Racl蛋白对肝癌SK-Hepl细胞凋亡及坏死性凋亡通路的影响

发布时间：2022-01-03 09:59

　　目的:探讨Rac1蛋白对肝癌SK-Hep1和p⁰SK-Hep1细胞凋亡及坏死性凋亡的影响及其机制,明确Rac1调控肝癌细胞凋亡及坏死性凋亡的方式,从而为肝癌的基因靶向治疗研究提供新的实验依据。方法:1、体外培养SK-Hep1细胞,并诱导其线粒体DNA缺陷细胞（p⁰SK-Hep1）,应用台盘蓝排除法鉴定活细胞,采用RT-PCR法检测COX-I及COX-II的表达。2、选取坏死性凋亡抑制剂Nec-1的三种不同浓度（30μM、60μM、90μM）和广谱凋亡抑制剂 z-VAD-FMK（10μM、20μM、40μM）作用于 SK-Hep1 细胞 24 h,MTS法检测药物的最适作用浓度,采用流式细胞术检测凋亡及坏死性凋亡比例。3、加入RaclsiRNA下调Rac1在SK-Hep1和p⁰SK-Hep1细胞中的表达,采用流式细胞术检测凋亡率和坏死性凋亡率。4、用已筛选出的最佳作用浓度的Nec-1和z-VAD-FMK预处理SK-Hep1细胞和p⁰SK-Hep1细胞24 h,分别转染FADD,RIP1和TRAF6三种... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?（ａ）?：?ｐ°ＳＫ在不含丙酮酸和尿嘧啶核苷的培养基中生长第六天，几乎没有活细胞出现：??

在ＳＫ细胞中，ＣＯＸ－Ｉ、Ｃ０Ｘ－ＩＩ和ＧＡＰＤＨ均可表达，而在ｐ°ＳＫ??细胞中，ＣＯＸ－?Ｉ及Ｃ０Ｘ－ＩＩ几乎不表达，只有ＧＡＰＤＨ条带出现（Ｐ＜０．?０１）。??这些结果表明，我们成功构建了线粒体ＤＮＡ缺陷细胞模型（图２）。??１５??

?（Ｐ＜０．?０５）?Ｊ－ＶＡＤ－ＦＭＫ?浓度为?２０?（ｉＭ?时细胞生存率为?９１．?１０％＞?８７．?８２％??（４０?＿），（Ｐ＜０．?０５）。故选用浓度为６０?—的Ｎｅｃ－１和浓度为２０?—的??Ｚ－ＶＡＤ－ＦＭＫ干预细胞（表１、

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]氧化损伤与修复机制在黄曲霉毒素相关原发性肝癌的发生与化疗反应性中的作用[D]. 苏智雄.广西医科大学 2007

硕士论文
[1]Rac1及IRAK1在肝癌细胞中对细胞凋亡和坏死性凋亡的影响[D]. 张富敏.延边大学 2017
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本文编号：3566068