基于双色荧光传感器的癌细胞成像及microRNA定量检测

发布时间：2022-01-07 18:08

　　癌细胞中microRNA（miRNA）的灵敏成像对于疾病的诊断治疗具有重要意义,其中miRNA-21通常在多种癌细胞中异常表达.本文将DNA功能化的金纳米颗粒与发射波长分离的荧光染料FAM和Cy5. 5修饰的DNA通过含有光控基团PC-linker的DNA4作为桥梁进行自组装,构建了纳米传感器GDC.将302 nm紫外光作为启动开关,用其照射该体系时,Cy5. 5修饰的DNA3被释放,其荧光强度可作为内参比信号,用于标定进入细胞的组装体含量;细胞中miRNA-21作为催化分子,与外加燃料Fuel DNA共同作用下可实现催化放大,FAM修饰的DNA2被释放且被猝灭的荧光信号得以恢复,并作为检测信号.通过2种荧光信号强度（FL）的检测及FL_FAM/FL_{Cy5. 5}比值的计算,达到定量分析细胞中miRNA含量的目的.该体系可扣除因细胞内组装体含量不同造成的背景信号误差,不仅能显著提高检测准确度,还因存在催化循环而大大降低了检出限,比传统方法至少降低了3个数量级.该传感器的检出限为23. 1 pmol/L,通过定量计算得出He La细胞中miRNA的... 

【文章来源】：高等学校化学学报. 2020,41(06)北大核心EISCICSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1实验部分
    1.1试剂与仪器
    1.2实验过程
        1.2.1金纳米颗粒(GNP)的制备及表面DNA1的功能化修饰
        1.2.2金纳米颗粒-荧光染料DNA组装体(GDC)的制备
        1.2.3 GDC传感器的催化循环解组装响应
        1.2.4 GDC上DNA数目的测定
        1.2.5 GDC的细胞应用
        1.2.6 GDC的特异性与稳定性表征
        1.2.7 GDC的细胞毒性测定
2结果与讨论
    2.1实验原理
    2.2金纳米颗粒与荧光染料DNA组装过程的表征
    2.3 GDC纳米传感器的可行性
    2.4不同紫外光照时间对催化解组装的影响
    2.5 C'/L摩尔比对催化解组装的影响
    2.6 GDC传感器的特异性与稳定性
    2.7细胞荧光成像
    2.8 HeLa细胞中miRNA含量的定量计算


【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA的超灵敏检测研究进展[J]. 王子月,刘萌,张春阳.  高等学校化学学报. 2017(01)
[2]透明质酸修饰的介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备及在肿瘤化疗-热疗联合治疗中的应用[J]. 金新天,刘刚,李君哲,孙丽丽,王俊荣,李俊锋,李沛,陈文庆,王强,佟倜.  高等学校化学学报. 2016(02)



本文编号：3575015