YWHAE在大肠癌中的表达及其生物信息学分析
发布时间:2022-01-09 15:51
背景及目的:大肠癌(CRC)是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率在近年呈上升趋势,多数病人发病时已处于中晚期,转移及复发是患者死亡的主要原因。目前,手术治疗辅以放、化疗为主要的治疗手段,因此早期筛查与诊断大肠癌尤为重要。随着分子诊断学的不断发展,分子标记物逐渐用来早期筛查及诊断恶性肿瘤,其具有高灵敏度及特异性的特点。大量研究证明酪氨酸3-单加氧酶/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白,ε肽(Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation activation protein,epsilon,YWHAE)参与细胞的多种生理活动,在肿瘤的发生、发展、转移中发挥一定的作用。本文研究YWHAE在大肠癌中的表达情况以及对其生物信息学进行分析。通过挖掘相关专业数据库,探索YWHAE在大肠癌发生、发展、转移中的作用,旨为临床早期诊断大肠癌提供新型肿瘤标志物以及基因治疗靶点。方法:本实验方法涉及以下3个方面:(1)采用色谱与质谱联用技术来筛选差异表达的蛋白。(2)查阅大量相关文献,筛选出YWHAE作为本次实验的目标蛋白。应用We...
【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:60 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3.2?YWHAE的质谱图??
?第4章免疫印_迹试验验证YWHAE在大肠癌中的表达情况???根据试剂盒说明书进行ECL显色压胶片,然后用凝胶图像分析系统??对胶片进行扫描,选择自动吸光度分析,根据目标蛋白YWHAE与之??相对应的内参P?-actin条带的比值,从而来评价YWHAE的表达水??平。??4.2结果??免疫印迹实验验证了?YWHAE在大肠癌组织中表达高于癌旁组??织,结果如图4.2所示,其中,A为大肠癌组织,B为癌旁组织。??A?B??YWHAE?30KD??43KD??图4.2?YWHAE在大肠癌及癌旁组织中的表达??4.3讨论??免疫印迹实验(蛋白质印迹法)即Western?Blot是分子生物学、生??物化学和免疫遗传学中经常使用的一种实验方法。其基本原理是通过??特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或组织标本进行着色。通过分析??着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表??达情况的信息。蛋白质印迹技术逐渐从对复杂混合物中的特定蛋白质??的鉴定演变为直接对单个细胞中蛋白质检测,使其成为临床研究中重??要分析工具。蛋白质印迹技术可以用于作为HIV、寄生虫和真菌病的??临床诊断[45]。??19??
?l?5k"?1?.?〇.?〇???mutated??i4k-??画?3k-?。?,???B—u_??i?2k-。細歉。,。、9?—??■?ik_。戮,-???1?o??2?〇-??a.??LU??<??,?,?,?,?,?r??§?5k?10k?15k?20k?25k?30k??E??mRNA?Expression,?RSEM?(Batch?normalized?from?lllumina?HiSeq_RNASeqV2):?YWHAE??图5.5?YWHAE与TP53之间的表达相关性??5.2.3?COSMIC数据库分赌果??通过分析COSMIC数据库,我们可以得到YWHAE总突变类型??及其比例,如图3.5所示,该图显示了具有突变的所有类型,一共有??331例样本参与研究,括号中的数据表示具有特定突变类型的比率,??因为一种样本不止有一种突变类型,所示说各种突变类型样本数量总??和不等于总体样本数量。在表中,我们可以观察到,在各种突变类型??中,无义突变所占比例最小,占0.91%,错义突变所占比例最高,达??17.52%。其他突变类型所占比列较小,占比区间为0.00%-6.04%。具??体数据信息如图5.6所示。??27??
【参考文献】:
期刊论文
[1]14-3-3蛋白与肿瘤发生发展的研究进展[J]. 杨建军,秦环龙. 世界华人消化杂志. 2010(28)
本文编号:3579006
【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:60 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3.2?YWHAE的质谱图??
?第4章免疫印_迹试验验证YWHAE在大肠癌中的表达情况???根据试剂盒说明书进行ECL显色压胶片,然后用凝胶图像分析系统??对胶片进行扫描,选择自动吸光度分析,根据目标蛋白YWHAE与之??相对应的内参P?-actin条带的比值,从而来评价YWHAE的表达水??平。??4.2结果??免疫印迹实验验证了?YWHAE在大肠癌组织中表达高于癌旁组??织,结果如图4.2所示,其中,A为大肠癌组织,B为癌旁组织。??A?B??YWHAE?30KD??43KD??图4.2?YWHAE在大肠癌及癌旁组织中的表达??4.3讨论??免疫印迹实验(蛋白质印迹法)即Western?Blot是分子生物学、生??物化学和免疫遗传学中经常使用的一种实验方法。其基本原理是通过??特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或组织标本进行着色。通过分析??着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表??达情况的信息。蛋白质印迹技术逐渐从对复杂混合物中的特定蛋白质??的鉴定演变为直接对单个细胞中蛋白质检测,使其成为临床研究中重??要分析工具。蛋白质印迹技术可以用于作为HIV、寄生虫和真菌病的??临床诊断[45]。??19??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]14-3-3蛋白与肿瘤发生发展的研究进展[J]. 杨建军,秦环龙. 世界华人消化杂志. 2010(28)
本文编号:3579006
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