NPRL2影响去势抵抗性前列腺癌依维莫司耐药的机制研究

发布时间：2022-01-09 23:35

　　背景和目的近年来我国前列腺癌（Prostate cancer,PCa）患者人数明显增多,相当数量患者在确诊时已处于进展期。雄激素剥夺是治疗进展期PCa的重要手段,但PCa患者在雄激素剥夺内分泌治疗的同时几乎不可避免地发展为去势抵抗性前列腺癌（Castration resistant prostate cancer,CRPC）,CRPC容易获得性耐药,预后差。基础和临床证实仅围绕雄激素受体信号通路（Androgen receptor signaling pathways,ARSPs）治疗CRPC远远不够,而针对非雄激素受体信号通路（Non-androgen receptor signaling pathways,NARSPs）的药物可能发挥重要的治疗作用。其中PI3K-Akt-mTOR通路与CRPC的发生、发展和耐药密切相关。虽mTOR信号通路抑制剂-依维莫司副作用相对较小,但在CRPC患者临床试验中疗效不太满意,如何提高其疗效减少其耐药值得研究。我们课题组先前所关注的一个抑癌候选基因-氮通透酶调节样物2（NPRL2）可能参与mTOR信号通路,而该信号通路被证实参与细胞自噬,一种进化保守... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１?ＮＰＲＬ２在ＢＰＨ、ＰＣａ和ＣＲＰＣ中的免疫组织化学染色情况：Ａ／Ｂ为ＢＰＨ组织；Ｃ／Ｄ??为ＬＰＣ组织；Ｅ／Ｆ为ＡＰＣ组织；Ｇ／Ｈ为ＣＲＰＣ组织

２．３?ＰＣａ患者ＮＰＲＬ２表达与可能与其不良预后呈相关性??因上述统计分析ＮＰＲＬ２的表达与ＰＣａ患者部分临床病理资料具有一定相关??性，本研究对患者行Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存分析（见图１．３）。为此根据ＮＰＲＬ２的表达??强弱将患者两组：Ａ组为ＮＰＲＬ２表达阴性或弱阳性（－／＋）；?Ｂ组为（＋＋／＋＋＋）中??等阳性或强阳性。随访中有６位患者死于非肿瘤特异性死亡，中位随访时间６２个??月（范围：７－８８个月），期间７例患者失访。其中Ａ组４１例，８例在５年内死亡，??Ｂ组４７例，２６例在５年内死亡，Ａ组患者总体生存率高于Ｂ组（ｆ＝９．２６８，?Ｐ＝０．００２）。??为进一步分析ＮＰＲＬ２在不同ｐＴ分期患者是否有差异。患者再次分为ｐＴ３ａ及以下??（Ａ’组）和ｐＴ３ｂ及以上（Ｂ’组），Ａ’组患者６７例有１９例５年内死亡，而且该组??中ＮＰＲＬ２?（－／＋）的患者总体生存率长于ＮＰＲＬ２?（＃／＃＋）表达者（ｘ２＝８．５８７，??Ｐ＝０．００３），Ｂ’组患者２１例中１３例５年内死亡，但Ｂ’组中ＮＰＲＬ２?（－／＋）的患者总??体生存率与ＮＰＲＬ２?（＃／＃＋）表达者无明显区别（ｆ＝０．２６０，?Ｐ＝０．６１０）。另一方面，??Ｃｏｘ风险比例回归模型发现ＮＰＲＬ２的高表达可能是ＰＣａ患者一项不良预后因素??（见表１．３）。??２２??

１．２．２慢病毒转染ＬＮＣａＰ、ＰＣ３和ＬＮＰＥＲ细胞??病毒液体提前分装。先进行病毒感染预实验，根据吉玛基因公司的慢病毒（慢??病毒部分资料见图２．１）操作说明书Ｐ１２的靶细胞感染预实验操作说明，将５０００??细胞接种至９６孔板中，每孔１０叫，细胞融合率５０％左右，便于操作。ＭＯＩ值（病??毒拷贝数／所需感染的细胞数）设置１０、２０、４０、６０、１００不同梯度分别转染ＬＮＣａＰ、??ＰＣ３和ＬＮＰＥＲ细胞。每孔加入５ｎｇ／ｍｌ的Ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ。２４小时后更换新鲜细胞培养??液，转染７２小时后荧光显微镜下观察以估算细胞感染方法和感染参数。嘌呤霉素??３５??

【参考文献】：
期刊论文
[1]重组质粒pEGFP-N1-NPRL2对人胃癌细胞生物学特性的影响[J]. 胡在敏,王川,季文,刘波,蔡璨,姜政.  细胞与分子免疫学杂志. 2012(10)



本文编号：3579647