MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移
发布时间：2022-02-14 13:16
目的:探讨miR-26b在肺癌组织中的表达及miR-26b在肺癌细胞侵袭和迁移过程中的作用及其机制。方法:q PCR检测肺癌和正常肺组织中miR-26b的表达情况;荧光素酶报告基因检测miR-26b与人平衡核苷转运蛋白1（human equilibrative nucleoside transporter 1,hENT1）的相互作用;Transwell侵袭试验检测miR-26b的表达对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕试验检测miR-26b的表达对肺癌细胞迁移能力的影响;Western印迹检测h ENT1,ROCK-1,Rho A蛋白的表达情况;鬼笔环肽染色观察miR-26b-mimic处理后细胞骨架的变化情况;裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肺癌成瘤大小及体积的影响。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中miR-26b表达明显降低;且晚期、低分化和有淋巴结转移的肺癌组织miR-26b表达明显较早期、高分化和无淋巴结转移的肺癌组织低;miR-26b能与h ENT1的3’-UTR特异性结合;miR-26b可以调控肺癌A549细胞的侵袭迁移能力;过表达miR-26b可以抑制h ENT...
【文章来源】：中南大学学报(医学版). 2017,42(07)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)
MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移高阳，等7592.6MiR-26b调节hENT1，ROCK-1和RhoA的表达Western印迹结果显示：与NC组相比，miR-26b-mimic组中hENT1，RhoA和ROCK-1表达水平明显下降[hENT1为(22.6±1.9)%vs(82.3±5.9)%；ROCK-1为(32.6±3.2)%vs(92.1±6.2)%；RhoA为(27.2±3.2)%vs(84.2±8.3)%，P<0.05；图4]。2.7MiR-26b调节肺癌细胞A549细胞骨架细胞骨架鬼笔环肽染色表明：与NC组相比，miR-26b-mimic组A549细胞F-actin染色明显减少，细胞膜皱褶形成明显减少，伪足形成明显减少(图5)。2.8裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肿瘤生长的影响荷瘤小鼠生存时间为4~8周，中位生存时间为6周。尸体解剖见左腋下肿瘤均有生长，肿瘤呈灰白色，实性，圆形或椭圆形，表面有结节状突起，剖面呈鱼肉样，成瘤率100%。裸鼠肿瘤生长情况：MiR-26b-mimic组的肿瘤明显小于NC组；miR-26b-mimic组裸鼠肿瘤体积和质量均明显小于NC组(图6)。图2Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)Figure2EffectofmiR-26bontheinvasionabilityofA549cellsdetectedbyTranswellmatrigelinvasionassays(×400)NCmiR-26b-mimicmiR-26b-mimicNC0h24h48h72h图3划痕试验检测miR-26b-mimic对人肺癌细胞A549迁移能力的影响(×400)Figure3EffectofmiR-26b-mimicontheA549cellsmigrationabilitydetectedbywoundhealingassays(×400)图4Western印迹检测miR-26b-mimic处理后hENT1，ROCK-1和RhoA蛋白的表达Figure4ExpressionofhENT1,ROCK-1andRhoAdetectedbyWesternblotafterinducedwithmiR-26b-mimichENT1ROCK-1RhoAGAPDHNCmiR-26b-mimic
MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移高阳，等7592.6MiR-26b调节hENT1，ROCK-1和RhoA的表达Western印迹结果显示：与NC组相比，miR-26b-mimic组中hENT1，RhoA和ROCK-1表达水平明显下降[hENT1为(22.6±1.9)%vs(82.3±5.9)%；ROCK-1为(32.6±3.2)%vs(92.1±6.2)%；RhoA为(27.2±3.2)%vs(84.2±8.3)%，P<0.05；图4]。2.7MiR-26b调节肺癌细胞A549细胞骨架细胞骨架鬼笔环肽染色表明：与NC组相比，miR-26b-mimic组A549细胞F-actin染色明显减少，细胞膜皱褶形成明显减少，伪足形成明显减少(图5)。2.8裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肿瘤生长的影响荷瘤小鼠生存时间为4~8周，中位生存时间为6周。尸体解剖见左腋下肿瘤均有生长，肿瘤呈灰白色，实性，圆形或椭圆形，表面有结节状突起，剖面呈鱼肉样，成瘤率100%。裸鼠肿瘤生长情况：MiR-26b-mimic组的肿瘤明显小于NC组；miR-26b-mimic组裸鼠肿瘤体积和质量均明显小于NC组(图6)。图2Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)Figure2EffectofmiR-26bontheinvasionabilityofA549cellsdetectedbyTranswellmatrigelinvasionassays(×400)NCmiR-26b-mimicmiR-26b-mimicNC0h24h48h72h图3划痕试验检测miR-26b-mimic对人肺癌细胞A549迁移能力的影响(×400)Figure3EffectofmiR-26b-mimicontheA549cellsmigrationabilitydetectedbywoundhealingassays(×400)图4Western印迹检测miR-26b-mimic处理后hENT1，ROCK-1和RhoA蛋白的表达Figure4ExpressionofhENT1,ROCK-1andRhoAdetectedbyWesternblotafterinducedwithmiR-26b-mimichENT1ROCK-1RhoAGAPDHNCmiR-26b-mimic
本文编号：3624629
【文章来源】：中南大学学报(医学版). 2017,42(07)北大核心CSCD
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Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)
MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移高阳，等7592.6MiR-26b调节hENT1，ROCK-1和RhoA的表达Western印迹结果显示：与NC组相比，miR-26b-mimic组中hENT1，RhoA和ROCK-1表达水平明显下降[hENT1为(22.6±1.9)%vs(82.3±5.9)%；ROCK-1为(32.6±3.2)%vs(92.1±6.2)%；RhoA为(27.2±3.2)%vs(84.2±8.3)%，P<0.05；图4]。2.7MiR-26b调节肺癌细胞A549细胞骨架细胞骨架鬼笔环肽染色表明：与NC组相比，miR-26b-mimic组A549细胞F-actin染色明显减少，细胞膜皱褶形成明显减少，伪足形成明显减少(图5)。2.8裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肿瘤生长的影响荷瘤小鼠生存时间为4~8周，中位生存时间为6周。尸体解剖见左腋下肿瘤均有生长，肿瘤呈灰白色，实性，圆形或椭圆形，表面有结节状突起，剖面呈鱼肉样，成瘤率100%。裸鼠肿瘤生长情况：MiR-26b-mimic组的肿瘤明显小于NC组；miR-26b-mimic组裸鼠肿瘤体积和质量均明显小于NC组(图6)。图2Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)Figure2EffectofmiR-26bontheinvasionabilityofA549cellsdetectedbyTranswellmatrigelinvasionassays(×400)NCmiR-26b-mimicmiR-26b-mimicNC0h24h48h72h图3划痕试验检测miR-26b-mimic对人肺癌细胞A549迁移能力的影响(×400)Figure3EffectofmiR-26b-mimicontheA549cellsmigrationabilitydetectedbywoundhealingassays(×400)图4Western印迹检测miR-26b-mimic处理后hENT1，ROCK-1和RhoA蛋白的表达Figure4ExpressionofhENT1,ROCK-1andRhoAdetectedbyWesternblotafterinducedwithmiR-26b-mimichENT1ROCK-1RhoAGAPDHNCmiR-26b-mimic
MiR-26b靶向hENT1通过RhoA/ROCK-1通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移高阳，等7592.6MiR-26b调节hENT1，ROCK-1和RhoA的表达Western印迹结果显示：与NC组相比，miR-26b-mimic组中hENT1，RhoA和ROCK-1表达水平明显下降[hENT1为(22.6±1.9)%vs(82.3±5.9)%；ROCK-1为(32.6±3.2)%vs(92.1±6.2)%；RhoA为(27.2±3.2)%vs(84.2±8.3)%，P<0.05；图4]。2.7MiR-26b调节肺癌细胞A549细胞骨架细胞骨架鬼笔环肽染色表明：与NC组相比，miR-26b-mimic组A549细胞F-actin染色明显减少，细胞膜皱褶形成明显减少，伪足形成明显减少(图5)。2.8裸鼠皮下成瘤试验检测miR-26b-mimic对肿瘤生长的影响荷瘤小鼠生存时间为4~8周，中位生存时间为6周。尸体解剖见左腋下肿瘤均有生长，肿瘤呈灰白色，实性，圆形或椭圆形，表面有结节状突起，剖面呈鱼肉样，成瘤率100%。裸鼠肿瘤生长情况：MiR-26b-mimic组的肿瘤明显小于NC组；miR-26b-mimic组裸鼠肿瘤体积和质量均明显小于NC组(图6)。图2Transwell侵袭试验检测miR-26b对人肺癌细胞A549侵袭能力的影响(×400)Figure2EffectofmiR-26bontheinvasionabilityofA549cellsdetectedbyTranswellmatrigelinvasionassays(×400)NCmiR-26b-mimicmiR-26b-mimicNC0h24h48h72h图3划痕试验检测miR-26b-mimic对人肺癌细胞A549迁移能力的影响(×400)Figure3EffectofmiR-26b-mimicontheA549cellsmigrationabilitydetectedbywoundhealingassays(×400)图4Western印迹检测miR-26b-mimic处理后hENT1，ROCK-1和RhoA蛋白的表达Figure4ExpressionofhENT1,ROCK-1andRhoAdetectedbyWesternblotafterinducedwithmiR-26b-mimichENT1ROCK-1RhoAGAPDHNCmiR-26b-mimic
本文编号：3624629
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