PRMT5通过NF-κB信号通路调控膀胱癌增殖和凋亡

发布时间：2022-04-23 19:18

　　目的:膀胱癌是最常见的泌尿系统癌症,每年新发病例以及死亡病例在不断上升。膀胱癌的诊断主要是基于膀胱与尿路细胞学的检查,因诊断的敏感度较低,因此许多患者在患癌早期难以察觉。从基因水平探索基因表达变化与膀胱癌发生发展的关系可能会为膀胱癌诊断以及开发靶向药物提供新的方向,为寻找非侵入性,敏感性和特异性高的检查方法提供新思路。蛋白质精氨酸甲基转移酶（protein arginine methyltransferase,PRMTs）参与生物体的多项生理进程。PRMT5具有保守的甲基转移酶催化结构,在多种类型的细胞中广泛存在,而在不同的细胞中其含量水平又不尽相同。PRMT5催化的甲基化修饰在许多细胞中都发挥重要作用,其异常表达影响多种类型恶性肿瘤的发展。PRMT5发挥其生物学功能主要的方式有两种,其一是表观遗传调控靶基因的表达。其二是通过甲基化作用,直接修饰细胞中关键的信号分子。本次研究我们将探究PRMT5在膀胱肿瘤中的表达模式及临床病理意义。并分别通过体内外实验分析PRMT5表达水平变化对膀胱癌产生的影响及其潜在的分子机制。研究方法:1.免疫组织化学:80例膀胱癌组织（病理类型为移行细胞癌）以及... 

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 :PRMT5在膀胱癌组织及细胞中的表达及临床意义
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 主要试剂及生产商
        2.2 主要仪器及生产商
        2.3 实验方法
            2.3.1 免疫组织化学
            2.3.2 实时荧光定量PCR
            2.3.3 细胞培养
            2.3.4 Western blot
        2.4 统计分析
    3 结果
        3.1 PRMT5在膀胱癌组织中高表达
        3.2 PRMT5在膀胱癌细胞系中高表达
        3.3 PRMT5表达异常与膀胱癌患者的生存相关
        3.4 PRMT5表达水平与膀胱癌病理T分期显著相关
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :PRMT5 通过NF-κB信号通路促进膀胱癌增殖,抑制膀胱癌凋亡
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 主要试剂及生产商
        2.2 主要仪器及生产商
        2.3 实验步骤
            2.3.1 细胞培养
            2.3.2 细胞转染与干扰
            2.3.3 Western blot
            2.3.4 实时荧光定量PCR
            2.3.5 细胞增殖和集落形成实验
            2.3.6 细胞凋亡实验
            2.3.7 线粒体膜电位JC-1实验
            2.3.8 荧光素酶检测实验
            2.3.9 CHIP实验
        2.4 统计分析
    3 结果
        3.1 PRMT5促进膀胱癌细胞增殖
        3.2 PRMT5抑制膀胱癌细胞凋亡并上调线粒体膜电位
        3.3 抑制PRMT5 上调膀胱癌Cleaved-caspase3 蛋白表达水平
        3.4 下调PRMT5 抑制NF-κB活性及其靶基因表达
    4 讨论
    5 结论
第三部分 :PRMT5促进膀胱细胞小鼠移植瘤的形成与机制
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 主要试剂及生产商
        2.2 主要仪器及生产商
        2.3 实验步骤
            2.3.1 细胞培养
            2.3.2 小鼠肿瘤模型构建
            2.3.3 实时荧光定量PCR
        2.4 统计分析
    3 结果
        3.1 膀胱癌细胞T24培养情况
        3.2 PRMT5促进膀胱肿瘤体积的增大
        3.3 PRMT5促进膀胱肿瘤重量的增加
        3.4 在小鼠膀胱肿瘤模型中,PRMT5调控凋亡相关蛋白的表达
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]Developmental expression of three prmt genes in Xenopus[J]. Cheng-Dong Wang,Xiao-Fang Guo,Thomas Chi Bun Wong,Hui Wang,Xu-Feng Qi,Dong-Qing Cai,Yi Deng,Hui Zhao.  Zoological Research. 2019(02)
[2]SA-hTNF-α膜锚定修饰治疗表浅膀胱癌的实验研究[J]. 陈忠,谭万龙,黄鑫,梁中锟,徐翠香,高基民.  南方医科大学学报. 2010(05)



本文编号：3647821