RSU1在肿瘤发生发展中作用的研究

发布时间：2022-07-23 14:14

　　乳腺癌是女性发病率最高的癌症,也是造成女性癌症死亡的主要要原因。近年来,针对乳腺癌的研究虽然取得了很大程度上的进展,但是仍存在很多难以解决的问题。探寻新的乳腺癌的发病机制和转移途径,找到新的调控乳腺癌发生发展的关键分子,从而降低乳腺癌的发病率和死亡率,是我国目前亟待解决的问题。Ras抑制蛋白1（Ras suppressor 1,RSU1）是一个高度保守的蛋白质,从抑制Ras癌基因转化能力的表达克隆实验中首次分离出来而命名。RSU1通过LRR结构域以高亲和力与PINCH1的LIM5结构域相结合,与ILK-PINCH-Parvin形成IPPR复合物,并定位于细胞-细胞外基质（extracellular matrix,ECM）黏附,在肌动蛋白细胞骨架重塑中发挥重要作用。有研究报道RSU1缺失引起细胞黏附和迁移的变化,负向调控肿瘤的增殖和转移。然而,同时也有研究表明RSU1缺失或突变可通过降低PTEN信号传导或改变JNK活性而有助于癌症的发生和发展。RSU1广泛存在于各种细胞中,我们的前期研究发现,RSU1全身性基因敲除导致小鼠在胚胎发育过程中致死。在过去的研究中,由于缺乏合适的动物模型,对R... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
    1.1 本课题的研究意义
    1.2 乳腺癌现状
    1.3 RSU1的生物学功能和其在人类疾病中的作用
    1.4 RSU1在肿瘤发生发展中的作用的研究
    1.5 本课题的研究内容
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验细胞、菌株、抗体、质粒、引物、动物等
        2.1.2 实验试剂与试剂盒
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 主要分析软件
    2.2 实验方法
        2.2.1 常规实验方法
        2.2.2 细胞培养及转染
        2.2.3 构建细胞体系
        2.2.4 悬浮、黏附细胞培养实验
        2.2.5 Colony Formation增殖实验
        2.2.6 Agar Formation增殖实验
        2.2.7 细胞迁移实验
        2.2.8 蛋白质免疫印迹(Western blotting)
        2.2.9 小鼠基因型鉴定(genotyping)
        2.2.10 小鼠成瘤实验
        2.2.11 组织包埋切片
        2.2.12 免疫组织化学分析(immunohistochemistry)
        2.2.13 苏木精—伊红(H&E)染色
第3章 RSU1对乳腺癌细胞的影响
    3.1 引言
    3.2 敲除RSU1乳腺肿瘤细胞株的构建
    3.3 RSU1缺失对细胞迁移的影响
    3.4 RSU1缺失对细胞克隆形成的影响
    3.5 RSU1对MAPK信号通路的调控
    3.6 本章小结
第4章 肿瘤细胞微环境中RSU1缺失对肿瘤生长的影响
    4.1 引言
    4.2 内皮敲除RSU1小鼠模型的构建
    4.3 微环境(内皮组织)中RSU1缺失对肺癌肿瘤生长的影响
    4.4 细胞微环境(内皮组织)RSU1缺失对肺癌肿瘤转移的影响
    4.5 本章小结
结论
    总结与讨论
    不足
    展望
参考文献
致谢



本文编号：3665288