PAK5在肺腺癌中的表达及对A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

发布时间：2022-09-18 19:01

　　目的:肺癌是我国最普遍的恶性肿瘤之一,其致死率居首位。肺癌分为两大亚型:小细胞肺癌（small cell lung cancer）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,其中NSCLC约占原发性肺癌的85%,NSCLC主要包括鳞状上皮细胞癌、腺癌和大细胞癌,肺腺癌是NSCLC最常见的亚型,由于缺乏特异敏感的早期诊断方法和有效的治疗方法,肺癌5年生存率较低。据估计,如果所有分期的肺癌患者合并统计,肺腺癌生存率只有18%。因而,需要筛选新的肺腺癌相关基因来提供有效的治疗靶点。P21活化激酶5（PAK5）于2002年首次被克隆,并被鉴定为一种脑特异性激酶,参与了神经细胞中纤维蛋白的形成。PAK5是P21活化激酶（PAKs）家族最新发现的成员,定位于线粒体和细胞核内,PAK5基因位于人类染色体20p12上,编码相对分子质量80kDa蛋白。自从在脑神经元细胞中发现PAK5以来,越来越多的证据表明PAK5是肿瘤进展的重要介质。PAK5目前已被证实在多种肿瘤中高表达,调节肿瘤细胞骨架改变、抗凋亡、促进肿瘤细胞侵袭、迁移和增殖等。目前PAK5在肺腺癌中的表达... 

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 材料
        1.1 细胞株及培养基
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备及耗材
        1.4 主要试剂的制备
    2 组织标本
    3 免疫组织化学
    4 细胞培养
        4.1 细胞复苏
        4.2 细胞传代
        4.3 细胞冻存
        4.4 细胞计数
    5 A549细胞PAK5基因沉默株构建
        5.1 PAK5 RNA干扰慢病毒载体的构建和包装
        5.2 慢病毒转染方法
    6 Western Blot实验
        6.1 提取细胞蛋白
        6.2 Western Blot
    7 细胞增殖实验(CCK8实验)
        7.1 制备细胞悬液
        7.2 细胞计数
        7.3 96孔板接种细胞
    8 细胞划痕愈合实验
    9 Transwell侵袭实验
    10 统计学处理
结果
    1 肺腺癌组织和癌旁组织中PAK5表达情况
    2 PAK5蛋白的表达水平与患者临床病理特征的关系
    3 PAK5蛋白的表达水平与患者预后的关系
    4 A549细胞PAK5基因沉默株成功构建
    5 PAK5基因沉默对A549细胞增殖能力的影响
    6 PAK5基因沉默对A549细胞迁移、侵袭能力的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Group Ⅱ p21-activated kinases as therapeutic targets in gastrointestinal cancer[J]. Yang-Guang Shao,Ke Ning,Feng Li.  World Journal of Gastroenterology. 2016(03)



本文编号：3680249