低氧微环境下circCDR1as调控口腔鳞状细胞癌自噬的机制研究

发布时间：2022-09-30 16:39

　　目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是全世界最常见的恶性肿瘤之一。自噬作为一种重要的非选择性降解机制,可以通过维持细胞稳态和细胞代谢以及细胞活力影响肿瘤的发生和发展。CircCDR1as作为促癌基因在癌症中的作用已经被证实,但是circCDR1as在OSCC中对自噬的调控机制尚未明确。本研究旨在探讨circCDR1as与OSCC细胞自噬的潜在性机制。方法:1、采用免疫组化检测57对OSCC组织和癌旁组织中低氧诱导因子和自噬相关蛋白的表达,并分析它们的相关性;采用低氧处理Tca-8113细胞后,应用Western blot、免疫荧光和透射电镜的方法检测低氧条件对细胞自噬和细胞凋亡的影响。2、构建 circCDR1as环状过表达真核载体,在OSCC细胞系Tca-8113中过表达circCDR1as;经低氧干预、雷帕霉素或3-MA处理后,应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光实验检测细胞自噬变化和circCDR1as表达变化,评价circCDR1as对低氧介导的自噬的调控作用。3、在低氧条件下,采用CCK-8和细胞流式仪通过... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 细胞系与组织样本
        1.2 PCR所需引物
        1.3 主要实验仪器
        1.4 主要生化试剂
    2 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)
        2.3 透射电镜
        2.4 Western Blotting
        2.5 免疫组化
        2.6 免疫荧光
        2.7 CCK-8测定
        2.8 流式细胞术检测凋亡
        2.9 ROS检测
        2.10 双荧光素酶报告实验
        2.11 裸鼠成瘤实验
        2.12 生物信息学分析
        2.13 统计分析
结果
    1 低氧微环境促进OSCC中自噬相关蛋白的表达水平
    2 CircCDR1as促进OSCC细胞中低氧介导的自噬
    3 CircCDR1as调节OSCC细胞自噬和内质网应激促进细胞存活
    4 低氧微环境下circCDR1as对自噬相关通路的影响
    5 CircCDR1as作为miR-671-5p的吸附海绵促进细胞自噬
    6 CircCDR1as促进裸鼠体内OSCC肿瘤的生长
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3683901