HDAC4/miR-200a反馈回路调控胃癌细胞增殖、侵袭、转移的研究

发布时间：2022-10-15 18:21

　　目的:明确HDAC4与miR-200a在胃癌组织中的表达情况,探讨HDAC4/miR-200a反馈回路对胃癌细胞增殖、侵袭、转移的影响,为胃癌的治疗提供更多依据,发现治疗胃癌可能潜在的新靶点。方法:选取40例胃癌患者的癌组织及对应的癌旁组织标本,采用免疫组化方法检测HDAC4的表达情况,同时利用荧光定量PCR技术检测上述40例标本中HDAC4的mRNA与miR-200a的表达情况。分别在BGC-823胃癌细胞系中使用质粒上调HDAC4的表达、siRNA下调HDAC4的表达,利用荧光定量PCR检测miR-200a的表达;使用慢病毒转染上调miR-200a的表达,并通过western-bolt检测HDAC4的表达。通过western-bolt检测分别检测上述各组细胞ZEB1、ZEB2、上皮细胞标志物E-钙粘连蛋白（E-cadherin）与间质细胞标志物N-钙粘连蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达情况,使用EdU细胞增殖检测试剂盒以及Cell Counting Kit-8试剂检测细胞的增殖能力,transwell实验分别检测胃癌细胞的侵袭、转移能力。所有实验数据... 

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词表
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 组织样本与临床资料
        2.1.2 细胞株
        2.1.3 质粒
        2.1.4 siRNA
        2.1.5 慢病毒
        2.1.6 引物
        2.1.7 主要试剂
        2.1.8 实验仪器及设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 组织样本与细胞的RNA提取
        2.2.2 反转录合成cDNA
        2.2.3 荧光定量PCR
        2.2.4 细胞培养、换液、传代与冻存
        2.2.5 细胞转染
        2.2.6 CCK-8细胞增殖实验
        2.2.7 EDU实验检测细胞增殖
        2.2.8 Transwell实验检测细胞侵袭、转移
        2.2.9 Western bolt实验
        2.2.10 石蜡切片免疫组化染色实验
        2.2.11 统计学分析
第三章 结果
    3.1 胃癌组织与癌旁组织中HDAC4与miR-200a的表达
    3.2 HDAC4 调控miR-200a的表达
        3.2.1 下调HDAC4 的表达会增加mi R-200a的表达
        3.2.2 上调HDAC4 的表达会降低mi R-200a的表达
    3.3 HDAC4 诱导EMT
        3.3.1 下调HDAC4 的表达会抑制EMT
        3.3.2 上调HDAC4 的表达会诱导EMT
    3.4 HDAC4促进胃癌细胞增殖
        3.4.1 下调HDAC4的表达会抑制胃癌细胞增殖
        3.4.2 上调HDAC4的表达会促进胃癌细胞增殖
    3.5 .HDAC4促进胃癌细胞侵袭转移
        3.5.1 .下调HDAC4的表达会抑制胃癌细胞侵袭转移
        3.5.2 .上调HDAC4的表达会促进胃癌细胞侵袭转移
    3.6 .miR-200a调控HDAC4 的表达
    3.7 .miR-200a抑制EMT
    3.8 .miR-200a抑制胃癌细胞增殖
    3.9 .miR-200a抑制胃癌细胞侵袭转移
第四章 讨论
第五章 结论
    5.1 主要结论
    5.2 研究展望
参考文献
综述
    参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3691804