利用活体流式细胞术和受激拉曼散射成像技术检测肿瘤细胞

发布时间：2022-10-30 14:19

　　肿瘤已经有近5000年的历史,从第一例肿瘤病人被诊断至今漫长的岁月中,它一直是威胁人类健康的重大疾病之一,超过90%的肿瘤病人死亡是由肿瘤转移造成的。肿瘤细胞从原位肿瘤脱落后会进入血液循环和淋巴循环,在遇到合适的生存环境时增殖形成远端病灶,研究从原位肿瘤转移出来的肿瘤细胞对于探索肿瘤转移机制、促进临床检测和肿瘤预后具有非常重要的意义。近些年来,随着肿瘤检测技术的发展,人类对肿瘤转移的理解越来越深入。传统的肿瘤细胞病理检测技术多为体外检测,需要进行采血或者制作病理切片对肿瘤细胞进行检测。这在很大程度上改变了肿瘤细胞的生理环境,增加了检测结果的误差,而且无法长时间连续检测。本论文研究课题的目标是发展利用活体流式细胞术和受激拉曼散射成像技术检测血液和淋巴结中与肿瘤转移相关的肿瘤细胞的方法,并用这些方法研究肿瘤转移过程中循环肿瘤细胞团块比例的动态变化、循环肿瘤细胞的时间分布规律,以及淋巴结中的肿瘤细胞的无标记光学检测。目前尚没有可行的技术手段检测活体小动物血液中的循环肿瘤细胞团块,因此我们首先搭建了用于实验的活体流式细胞仪,利用它检测小鼠原位肝癌模型和皮下前列腺癌模型血液中的循环肿瘤细胞团块。... 

【文章页数】：149 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文对照表
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 血液与淋巴循环中的肿瘤细胞
    1.3 肿瘤细胞检测方法现状概述
        1.3.1 传统检测技术在肿瘤细胞检测上的局限
        1.3.2 肿瘤细胞的体外检测方法
        1.3.3 肿瘤细胞的活体检测方法
    1.4 流式细胞术
        1.4.1 体外流式细胞术
        1.4.2 活体流式细胞术
    1.5 受激拉曼散射成像技术
        1.5.1 拉曼散射与拉曼光谱
        1.5.2 受激拉曼散射成像技术
    1.6 本课题研究内容与意义
第二章 活体流式细胞术在循环肿瘤细胞团块检测中的应用
    2.1 引言
        2.1.1 循环肿瘤细胞团块研究现状
        2.1.2 循环肿瘤细胞团块检测方法概述
        2.1.3 本章研究问题
    2.2 实验材料与方法
        2.2.1 实验细胞和动物
        2.2.2 动物模型构建
        2.2.3 活体流式细胞术
        2.2.4 数据处理方法
        2.2.5 统计方法
    2.3 实验结果
        2.3.1 根据信号峰形状判别循环肿瘤细胞团块
        3.3.2 原位肝癌模型与前列腺皮下模型中循环肿瘤细胞团块的数量和比例变化
    2.4 本章小结与讨论
        2.4.1 本章小结
        2.4.2 讨论
第三章 活体流式细胞术在研究循环肿瘤细胞时间分布中的应用
    3.1 引言
        3.1.1 肿瘤时间分布研究背景
        3.1.2 本章研究问题
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 实验细胞与动物
        3.2.2 实验数据获取与处理
        3.2.3 统计分析过程
    3.3 实验结果
        3.3.1 通过直接观察发现循环肿瘤细胞时间分布不均
        3.3.2 肝癌模型中的循环肿瘤细胞时间分布不均
        3.3.3 前列腺癌模型中的循环肿瘤细胞时间分布不均
    3.4 本章小结与讨论
        3.4.1 本章小结
        3.4.2 讨论
第四章 受激拉曼成像技术用于检测淋巴结中的肿瘤细胞
    4.1 引言
        4.1.1 淋巴结与肿瘤转移
        4.1.2 TNM肿瘤分期系统
        4.1.3 本章研究内容
    4.2 受激拉曼成像系统搭建
        4.2.1 光路部分
        4.2.2 实验附件部分
    4.3 实验材料与方法
        4.3.1 实验细胞和动物
        4.3.2 动物实验协议(Animal Protocol)
        4.3.3 图像处理方法
    4.4 实验结果
        4.4.1 正常小鼠淋巴结结构成像
        4.4.2 皮下前列腺癌模型中的淋巴结检测
        4.4.3 自发肿瘤小鼠中的淋巴结检测
    4.5 本章小结与讨论
        4.5.1 本章小结
        4.5.2 讨论
第五章 研究总结与展望
    5.1 循环肿瘤细胞团块的活体流式信号形状与细胞数量和形状的关系
    5.2 利用受激拉曼成像技术对淋巴结结构进行无标记成像
    5.3 利用受激拉曼成像技术研究年龄增长对淋巴结的影响
    5.4 利用受激拉曼成像技术检测黑色素瘤
    5.5 受激拉曼散射成像技术检测灵敏度的提升
参考文献
附录 :程序代码
致谢
攻读博士学位期间学术成果



本文编号：3699048