利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性及Trim46基因低表达对胰腺癌细胞Capan-2的增殖和迁移能力的
发布时间:2022-11-04 01:21
目的基于实时细胞分析的技术发展,探索一种更加简便稳定的方法评估不同肿瘤细胞系对药物的敏感性,为前列腺癌和胰腺癌的临床治疗选择药物提供参考。方法选取VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌细胞系,和SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用多西他赛、卡巴他赛和醋酸阿比特龙三种前列腺癌常用治疗药物,及盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊两种胰腺癌常用治疗药物,细胞接种24小时后分别梯度浓度给药,利用RTCA监测给药前后的细胞生长曲线,计算药物对前列腺癌细胞和胰腺癌细胞的半抑制浓度(IC50)。对胰腺癌细胞培养板内给药,利用AO/EB染色和激光共聚焦观察,验证盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊所得IC50值。结果多西他赛对 VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4、PC-3M-IE8 五种细胞系 24h的 IC50 分别为 8.81 nM、11.61 nM、1.78 nM、1.44 nM、8.69 nM。卡巴他赛对五种细胞系 24 h 的 IC50 分别为 3.73 nM、3.96 nM、10.41 nM、5.43 nM、7.37 nM...
【文章页数】:70 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
第一部分 利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性
摘要
Abstract
前言
材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 实验药物
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 确定E-plate 16细胞最佳接种量
2.2.3 实验药物的配置
2.2.4 RTCA药物敏感性评价
2.2.5 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色
2.2.6 统计学方法
结果
3.1 细胞最佳接种量的确定
3.2 前列腺癌细胞对多西他赛敏感性对比分析
3.3 前列腺癌细胞对卡巴他赛敏感性对比分析
3.4 前列腺癌细胞对醋酸阿比特龙敏感性对比分析
3.5 胰腺癌细胞对盐酸吉西他滨敏感性对比分析
3.6 胰腺癌细胞对替吉奥胶囊敏感性对比分析
3.7 AO/EB染色验证胰腺癌细胞对盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊的敏感性
讨论
结论
参考文献
第二部分 Trim46基因低表达对胰腺癌细胞Capan-2的增殖和迁移能力的抑制
摘要
Abstract
前言
材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 Trim46低表达胰腺癌细胞系的构建
2.2.3 Western blot检测Trim46基因蛋白及相关蛋白表达情况
2.2.4 免疫荧光观察Trim46蛋白与相关蛋白在细胞内共定位情况
2.2.5 Trim46低表达对胰腺癌细胞增殖能力的影响
2.2.6 Trim46低表达对胰腺癌细胞迁移能力的影响
2.2.7 统计学方法
结果
3.1 Capan-2 Trim46低表达细胞系的建立
3.2 Trim46蛋白与相关蛋白在细胞内共定位情况
3.3 TRIM46低表达对相关蛋白表达量的影响
3.4 Trim46低表达对细胞增殖能力的影响
3.5 Trim6低表达对细胞迁移能力的影响
讨论
结论
参考文献
致谢
个人基本情况
硕士期间发表论文情况
【参考文献】:
期刊论文
[1]吉西他滨诱导胰腺癌PANC-1细胞耐药与C-IAP2表达关系的研究[J]. 张帆,黄鹤光. 中国临床药理学杂志. 2016(06)
[2]体外肿瘤细胞药敏试验方法概述[J]. 李婷,贾钰铭,雷开键. 现代肿瘤医学. 2016(05)
[3]374例恶性肿瘤患者化疗药物敏感性研究[J]. 喻卫红,孙涛,刘文中,李英辉,逯晓波,陆垚. 肿瘤学杂志. 2014(05)
[4]胰腺癌综合诊治中国专家共识(2014年版)[J]. 王理伟,陈栋晖,李琦,楼文辉,夏廷毅,潘宏铭,王俭,张智弘,白永瑞. 临床肿瘤学杂志. 2014(04)
[5]恶性肿瘤药物敏感性试验方法及其临床应用研究进展[J]. 陈娟,程国华,陈历排,汪小乐. 中国药房. 2013(25)
[6]肿瘤药敏试验方法的研究进展[J]. 沈续松,符立梧. 肿瘤研究与临床. 2012 (01)
[7]肿瘤药敏试验与临床病理及疗效的关系[J]. 颜克兰,唐东平,张传珉,左传田,张洁清,袁卫平,唐凯. 中国癌症防治杂志. 2011(01)
[8]肿瘤治疗的新里程碑——靶向药物治疗[J]. 孙燕. 肿瘤药学. 2011(01)
[9]肿瘤药敏试验指导个体化治疗的研究进展[J]. 米彦军,张传钊,符立梧. 药学学报. 2009(11)
[10]评估肿瘤化疗敏感性方法的研究进展[J]. 乔建梁,孟兴凯,张俊晶,齐力. 现代肿瘤医学. 2008(05)
本文编号:3700982
【文章页数】:70 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
第一部分 利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性
摘要
Abstract
前言
材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 实验药物
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 确定E-plate 16细胞最佳接种量
2.2.3 实验药物的配置
2.2.4 RTCA药物敏感性评价
2.2.5 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色
2.2.6 统计学方法
结果
3.1 细胞最佳接种量的确定
3.2 前列腺癌细胞对多西他赛敏感性对比分析
3.3 前列腺癌细胞对卡巴他赛敏感性对比分析
3.4 前列腺癌细胞对醋酸阿比特龙敏感性对比分析
3.5 胰腺癌细胞对盐酸吉西他滨敏感性对比分析
3.6 胰腺癌细胞对替吉奥胶囊敏感性对比分析
3.7 AO/EB染色验证胰腺癌细胞对盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊的敏感性
讨论
结论
参考文献
第二部分 Trim46基因低表达对胰腺癌细胞Capan-2的增殖和迁移能力的抑制
摘要
Abstract
前言
材料和方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 Trim46低表达胰腺癌细胞系的构建
2.2.3 Western blot检测Trim46基因蛋白及相关蛋白表达情况
2.2.4 免疫荧光观察Trim46蛋白与相关蛋白在细胞内共定位情况
2.2.5 Trim46低表达对胰腺癌细胞增殖能力的影响
2.2.6 Trim46低表达对胰腺癌细胞迁移能力的影响
2.2.7 统计学方法
结果
3.1 Capan-2 Trim46低表达细胞系的建立
3.2 Trim46蛋白与相关蛋白在细胞内共定位情况
3.3 TRIM46低表达对相关蛋白表达量的影响
3.4 Trim46低表达对细胞增殖能力的影响
3.5 Trim6低表达对细胞迁移能力的影响
讨论
结论
参考文献
致谢
个人基本情况
硕士期间发表论文情况
【参考文献】:
期刊论文
[1]吉西他滨诱导胰腺癌PANC-1细胞耐药与C-IAP2表达关系的研究[J]. 张帆,黄鹤光. 中国临床药理学杂志. 2016(06)
[2]体外肿瘤细胞药敏试验方法概述[J]. 李婷,贾钰铭,雷开键. 现代肿瘤医学. 2016(05)
[3]374例恶性肿瘤患者化疗药物敏感性研究[J]. 喻卫红,孙涛,刘文中,李英辉,逯晓波,陆垚. 肿瘤学杂志. 2014(05)
[4]胰腺癌综合诊治中国专家共识(2014年版)[J]. 王理伟,陈栋晖,李琦,楼文辉,夏廷毅,潘宏铭,王俭,张智弘,白永瑞. 临床肿瘤学杂志. 2014(04)
[5]恶性肿瘤药物敏感性试验方法及其临床应用研究进展[J]. 陈娟,程国华,陈历排,汪小乐. 中国药房. 2013(25)
[6]肿瘤药敏试验方法的研究进展[J]. 沈续松,符立梧. 肿瘤研究与临床. 2012 (01)
[7]肿瘤药敏试验与临床病理及疗效的关系[J]. 颜克兰,唐东平,张传珉,左传田,张洁清,袁卫平,唐凯. 中国癌症防治杂志. 2011(01)
[8]肿瘤治疗的新里程碑——靶向药物治疗[J]. 孙燕. 肿瘤药学. 2011(01)
[9]肿瘤药敏试验指导个体化治疗的研究进展[J]. 米彦军,张传钊,符立梧. 药学学报. 2009(11)
[10]评估肿瘤化疗敏感性方法的研究进展[J]. 乔建梁,孟兴凯,张俊晶,齐力. 现代肿瘤医学. 2008(05)
本文编号:3700982
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3700982.html
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