BET蛋白抑制剂JQ1增强索拉非尼对肝癌细胞的增殖抑制作用及机制

发布时间：2022-12-04 17:59

　　研究背景肝细胞癌是临床上常见的恶性肿瘤,居恶性肿瘤的第5位,在全世界与肿瘤相关的死亡中排第3位。肝细胞癌（HCC）是肝癌的主要组织学亚型,占原发性肝癌的90%,遗传和表观遗传学改变,慢性乙型病毒感染或丙型肝炎病毒感染,黄曲霉毒素暴露,吸烟,肥胖和糖尿病是肝癌的主要危险因素,肝癌预后不良的原因主要是由于高发生率的肿瘤复发和转移。目前,移植是治疗HCC的最有效方法,但由于肿瘤负担或肝功能不良,超过70%的晚期病例不适合移植。晚期不能耐受uuouuuuu手术的患者主要采取化疗,多靶点激酶抑制剂索拉非尼是FDA批准的一线靶向药物,但是也只能为晚期肝癌患者提供2.8个月的生存获益,此外由于不良反应和耐药性,使得其治疗效果尚不满意,因此努力寻找有效的药物和最优化的治疗方法是当前的研究重点。BRD4全称为bromodomain-containing protein 4,即溴结构域蛋白4,属于BET家族成员。BET溴结构域（bromodomain and extra-terminal domain）包含四种蛋白,即BRD2、BRD3、BRD4和BRDT。BET具有保守的模块化结构:包括两段N-末端串联... 

【文章页数】：66 页

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1 引言
2 材料
    2.1 细胞株
    2.2 药物及试剂
    2.3 仪器与设备
    2.4 常用液的配制
3 实验方法
    3.1 细胞培养
        3.1.1 细胞传代与培养
        3.1.2 细胞计数
        3.1.3 细胞冻存
        3.1.4 细胞复苏
    3.2 MTT 法测定细胞增殖抑制率
        3.2.1 JQ1和索拉非尼对肝癌细胞增殖抑制率和IC50测定
        3.2.2 JQ1和索拉非尼联用对肝癌细胞增殖抑制率测定
        3.2.3 JQ1和索拉非尼联合用药评价方式
    3.3 流式细胞仪测取细胞周期抑制率
    3.4 流式细胞仪测取细胞凋亡率
    3.5 Western-Blot检测
        3.5.1 蛋白质的样品制备
        3.5.2 蛋白定量
        3.5.3 蛋白电泳
        3.5.4 转膜
        3.5.5 封闭
        3.5.6 一抗孵育
        3.5.7 二抗孵育
        3.5.8 显影
    3.6 统计学方法
4 结果
    4.1 JQ1对肝癌细胞的增殖抑制作用
    4.2 索拉非尼对肝癌细胞的增殖抑制作用
    4.3 JQ1与索拉非尼联合对人肝癌细胞株增殖抑制作用
    4.4 JQ1 与索拉非尼联合对人肝癌细胞株细胞周期的影响
    4.5 JQ1 和索拉非尼联合对人肝癌细胞株的凋亡影响
    4.6 JQ1 与索拉非尼联合作用对肝癌细胞的凋亡蛋白Bcl-2、BIM、癌基因c-MYC的表达影响
5 讨论
6 结论
参考文献
附录 个人简历
致谢
综述 靶向 BET 溴结构域在肿瘤中的研究进展
    参考文献



本文编号：3708732