肝癌细胞DNA/Ag NCs对两类药物的研究及其miRNA-122的检测

发布时间：2022-12-23 01:58

　　癌症是严重威胁人类健康的常见病和多发病,而肝癌是世界上第三大最常见的和肿瘤死亡有关的疾病,占所有癌症的7%,其中肝细胞性肝癌在我国占原发性肝癌的90%[1]。全球每年约有50-100万人因肝癌致死,并且有逐年上升的趋势。最近的研究表明,肝癌是一种成体干细胞疾病,从肝癌实验模型看出它可能至少有三个不同的对致瘤性转化起作用的起源特性谱系[2,3]。流行病学资料显示,人类因癌症而引起的死亡率仅次于心脑血管疾病[1]。因此肝癌的及早发现和抗癌新药的研发显得格外重要。本论文在国家自科基金项目资助下展开,采用肝癌细胞DNA为模板合成的Ag NCs探针,研究了其对蒽醌类药物和新型铱配合物的影响,并用功能化的介孔硅检测了miRNA-122,为抗癌药物的研发和肝癌的及早发现提供了新的思路和方法。其主要内容如下:1.采用SMMC-7721肝癌细胞DNA为模板合成的Ag NCs作为光谱探针,构建了DNA/Ag NCs探针-药物体系,结合共振光散射光谱、荧光光谱法等化学分析方法对蒽醌类化合物进行了研究。研究了DNA/Ag NCs对四种蒽醌类抗癌药物的作用,并对其机理进行了初步的探讨。实验结果表明:DNA/Ag... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 抗癌药物的筛选研究
        1.1.1 体内筛选法
        1.1.2 体外筛选法
    1.2 贵金属纳米材料
        1.2.1 金属纳米团簇
        1.2.2 荧光金属纳米簇
        1.2.3 银纳米簇的合成
        1.2.4 荧光金属纳米簇的应用
    1.3 金属配合物抗癌活性的研究进展
        1.3.1 经典非铂类金属化合物
        1.3.2 非经典金属配合物
    1.4 miRNA简介
        1.4.1 miRNA-122的研究进展
        1.4.2 miRNA检测方法简介
    1.5 介孔硅纳米粒子（MSNs）
    1.6 本论文研究目的与研究内容
第2章 肝癌细胞DNA包封的银纳米簇探针与蒽醌类抗癌药物相互作用的研究
    2.1 实验部分
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 DNA/AgNCs的结构表征
        2.2.2 实验条件的优化
        2.2.3 DNA/Ag NCs-蒽醌类抗癌药物的RLS分析
        2.2.4 DNA/Ag NCs-蒽醌类抗癌药物体系的荧光光谱分析
        2.2.5 Ag NCs-蒽醌类抗癌药物体系的粘度分析
        2.2.6 Ag NCs-蒽醌类抗癌药物的MTT研究
        2.2.7 DNA/Ag NCs-蒽醌类抗癌药物的细胞凋亡
    2.3 本章小结
第3章 肝癌细胞DNA包封的银纳米簇探针与新型铱配合物相互作用的研究
    3.1 实验部分
        3.1.1 主要试剂
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 实验方法及过程
    3.2 实验结果与讨论
        3.2.1 反应条件的优化
        3.2.2 DNA/Ag NCs- IrL体系的光谱特征
        3.2.3 DNA/Ag NCs-IrL体系的粘度分析
        3.2.4 DNA/Ag NCs-IrL对癌细胞作用的研究
        3.2.5 DNA/Ag NCs-IrL的细胞凋亡
    3.3 本章小结
第4章 功能化的介孔硅材料共振光散射光谱探针对肝癌细胞中miRNA的研究
    4.1 实验仪器与试剂
    4.2 实验步骤：
        4.2.1 介孔硅MCM-41的合成
        4.2.2 介孔硅的修饰
        4.2.3 P1-MSNs对miRNA的检测
        4.2.4 miRNA的特异性检测
    4.3 实验结果与讨论
        4.3.1 实验原理
        4.3.2 功能化的的MSNs的表征
        4.3.3 反应条件的优化
        4.3.4 P1-MSNs对M1检测的共振光散射光谱特征
        4.3.5 P1-MSNs-M1体系的线性关系及灵敏度
        4.3.6 miRNA的特异性检测
    4.4 本章小结
第5章 全文总结与展望
    5.1 主要结论
        5.1.1 SMMC-7721 DNA包封的银纳米簇的合成
        5.1.2 肝癌细胞DNA包封的银纳米簇探针与蒽醌类抗癌药物相互作用的研究
        5.1.3 肝癌细胞DNA包封的银纳米簇探针与新型铱配合物相互作用的研究
        5.1.4 功能化的介孔硅材料共振光散射光谱探针对肝癌细胞中miRNA的研究
    5.2 工作展望
参考文献
致谢
附录 攻读硕士期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]小分子与核酸相互作用的研究进展[J]. 吴会灵,杨芃原,张重杰,何锡文.  分析化学. 2004(09)
[2]靶向RNA药物检测和筛选的生物物理学方法[J]. 殷玉和,王颖,傅学奇.  生命的化学. 2001(03)
[3]抗肿瘤药物筛选中MTT法和SRB法的比较[J]. 谭卫东,金红,罗弟祥,钟绍东,苏芝,彭旭东,高小平.  天然产物研究与开发. 1999(03)
[4]酸性磷酸酶法在体外化疗药物筛选中的应用[J]. 陈学清,杨晓鸥,潘国宗,朱峰.  癌症. 1998(06)
[5]抗癌药物与DNA相互作用的共振拉曼光谱研究[J]. 李蔚,陈五高,梁永茂.  中国激光医学杂志. 1998(02)
[6]抗癌药药效和机理评价新模式—Raman光谱分析[J]. 高小玲,ＬＳ．巴特勒,Ｒ克莱默,范贤俊.  激光生物学报. 1998(01)
[7]抗癌药物的电化学研究——Ⅰ.一种Fe（Ⅲ）Schiff碱配合物的基本电化学性质及其与DNA的相互作用[J]. 赵元弟,庞代文,王宗礼,程介克,乐芝凤,冯长建,沈昊宇,张香才.  化学学报. 1998(02)
[8]荧光法用于新型抗癌配合物Pd（tcd）（NO3）2初步筛选及作用机制研究[J]. 李志良,毕琼斯,李俊忠,熊劲芳,林辉祥,俞汝勤.  化学通报. 1997(06)
[9]14种钯抗癌络合物初步筛选的荧光法研究[J]. 林辉祥,李志良,戴桂林,毕琼斯,俞汝勤.  中国科学（B辑 化学 生命科学 地学）. 1992(07)
[10]Schiff碱非铂抗癌络合物初步筛选的荧光法研究[J]. 李志良,陈建华,章开诚,李梦龙,俞汝勤.  中国科学（B辑 化学 生命科学 地学）. 1991(11)



本文编号：3724481