NUDT21通过调节CPSF6的表达抑制乳腺癌的恶性进展

发布时间：2022-12-23 13:16

　　背景:乳腺癌（Breast Cancer）是全球主要的公共卫生问题之一,也是女性最为常见的恶性肿瘤,且其发病率仍呈持续上升的趋势,严重威胁到全球女性的生命健康。根据2020年美国癌症协会期刊《CA Cancer J Clin》发表的2020年全美肿瘤预估报告显示,在美国女性肿瘤发生率的排名中,乳腺癌已经超越肺癌成为首位。尽管近年来在基础研究中取得了较大的进展,但乳腺癌的防治仍是亟需解决的重要问题。NUDT21是一种RNA结合蛋白,在多种生物反应的调节中起着重要作用,且与肿瘤的发生发展息息相关。同时与乳腺癌细胞的增殖,侵袭和迁移以及上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的发生有着不可或缺的关系。探明NUDT21对乳腺癌发生发展的作用和机制可为乳腺癌的诊断和治疗提供新思路,NUDT21也可能作为乳腺癌检测的新标志物。目的:探讨NUDT21在乳腺癌中是否通过调节CPSF6抑制其发生发展;分析NUDT21对乳腺癌细胞的增殖,侵袭和迁移以及EMT的影响。方法:1)通过蛋白质印迹（western blot）方法检测NUDT21在乳腺癌细胞系,正常... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英文缩略词汇
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.材料与方法
    2.1 实验耗材与实验试剂
    2.2 实验仪器设备
    2.3 主要抗体
    2.4 细胞株
    2.5 标本来源
    2.6 实时荧光定量PCR引物序列
    2.7 siRNA序列
    2.8 实验步骤
        2.8.1 免疫组织化学
        2.8.2 细胞培养
            2.8.2.1 细胞培养条件
            2.8.2.2 细胞复苏
            2.8.2.3 细胞传代
            2.8.2.4 细胞冻存
        2.8.3 细胞转染
        2.8.4 Total RNA提取
        2.8.5 逆转录
        2.8.6 RT-qPCR
        2.8.7 Western blot
            2.8.7.1 SDS-PAGE凝胶制备
            2.8.7.2 蛋白制备
            2.8.7.3 蛋白上样
            2.8.7.4 凝胶电泳
        2.8.8 细胞活力检测
        2.8.9 细胞克隆形成实验
        2.8.10 细胞迁移和侵袭实验
        2.8.11 免疫沉淀实验
        2.8.12 银染实验
        2.8.13 DNA凝胶电泳鉴定
        2.8.14 切胶回收
        2.8.15 酶切
        2.8.16 连接
        2.8.17 细菌转化与挑菌
        2.8.18 小剂量质粒抽取
        2.8.19 中剂量质粒抽取
    2.9 统计学分析
3.实验结果
    3.1 NUDT21在乳腺癌细胞系、正常乳腺上皮细胞及临床组织样本中的表达
    3.2 NUDT21对乳腺癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响
        3.2.1 NUDT21 过表达对细胞内NUDT21 蛋白表达水平和细胞功能的影响
        3.2.2 NUDT21 敲低对细胞内NUDT21 蛋白表达水平和细胞功能的影响
    3.3 NUDT21 的表达在体外抑制乳腺癌细胞EMT过程
    3.4 质谱分析揭示NUDT21和CPSF6 蛋白之间相互作用
    3.5 CPSF6的表达促进乳腺癌细胞中的细胞增殖,迁移和侵袭
    3.6 NUDT21 通过调控CPSF6 表达抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭
4.讨论
5.结论
6.展望
参考文献
附录 个人简历
致谢
综述 NUDT21在肿瘤中研究进展
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]中原地区家族性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因突变的临床意义[J]. 程多,梁芳,张青松,霍彦平,张楠,郜辉,杜洁.  中国药物经济学. 2019(06)
[2]Snail介导的肺上皮间质转化在肌成纤维细胞活化中的作用[J]. 李思泠,朱钟慧,李秋月,许春杰,赵静,王炎,田琳.  首都医科大学学报. 2020(01)

硕士论文
[1]CPSF6在肝癌发生发展中的作用及其作用机制[D]. 邵运影.中国科学技术大学 2017



本文编号：3725165