一种高通量循环血液富集循环肿瘤细胞的装置

发布时间：2022-12-25 12:02

　　目的:通过具有生物相容性的微滤膜和外周血循环单通道闭合环路装置的结合来有效富集循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）。方法:使用均匀分布有直径为10μm大小微孔的派瑞林微滤膜;采用肺癌H1975细胞系,以不同浓度混入健康受试者外周血,体外免疫荧光实验检测微滤膜对肿瘤细胞的捕获率;进一步二代测序实验验证了基于微滤膜捕获肿瘤细胞行基因突变检测的敏感性。体内实验在猪模型中,验证该单通道闭合环路装置的安全性。结果:使用微滤膜可以在肺癌H1975细胞系样本中获得85.00%的捕获率。在一定的细胞浓度下,基于微滤膜捕获的肿瘤细胞可有效实现基因突变的检测,并且通过猪模型初步确定了装置的安全性。结论:基于微滤膜的单通道闭合环路装置是一种可实现高通量、高效的CTCs捕获设备,为后续CTCs的高效富集及基于CTCs的相关分子生物学检测、实时个体化治疗的探索奠定了基础。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 细胞培养
        1.3.2 微滤膜及肿瘤细胞加标 回收实验(Spiking recovery)
        1.3.3 免疫荧光染色
        1.3.4 图像分析和细胞计数
        1.3.5 二代测序分析
        1.3.6 动物体内实验初步探索单通道闭合环路装置的安全性
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 微滤膜和单通道闭合环路装置的构建
    2.2 基于微滤膜的细胞捕获
    2.3 基于微滤膜捕获细胞的二代测序分析
    2.4 经猪模型验证微滤膜和单通道闭合环路装置的安全性
3 讨论



本文编号：3726580