FANCI在肝细胞癌组织中表达及对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭影响的研究

发布时间：2023-02-01 21:07

　　目的肝癌在我国的发病率和死亡率位列前茅。随着影像学不断的发展,肝癌的早期诊断率也越来越高,外科根治性切除仍然是治疗的金标准,但是仍有大量肝癌患者发现时已是晚期,因此,寻找早期肝癌诊断的生物标记物是我们目前研究的难题。目前为止,还没有研究探索FANCI在肝细胞癌发生、发展中的机制作用,本研究旨在了解FANCI的功能失常是否参与肝细胞癌的发病过程;FANCI如何影响肝细胞癌的增殖、迁移、侵袭,为FANCI成为肝细胞癌诊断的标记物和治疗新靶点奠定实验基础。实验方法我们使用了q RT-PCR法确定了FANCI在HCC样本和细胞系中的表达水平,结合随访数据和TCGA数据库进行分析和预后的关系。体外功能实验我们制备了si-FANCI瞬转Hep3b细胞和Huh7细胞后,利用CCK-8测定法和集落形成实验测定基因与细胞增殖关系;使用Transwell测定法评估细胞迁移和侵袭;利用流式细胞数检测肿瘤细胞凋亡;通过免疫组化和蛋白印迹法鉴定FANCI蛋白在组织中含量。最后,体内功能实验通过裸鼠皮下成瘤异物种植实验验证了FANCI和肿瘤生长大小的关系。结果我们的结果表明,q RT-PCR检测显示FANCI在H... 

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
材料和方法
    1 临床病理标本收集及随访
    2 细胞培养
    3 细胞转染
    4 细胞增殖
    5 平板克隆形成
    6 Transwell迁移和侵袭实验
    7 细胞凋亡检测
    8 裸鼠成瘤实验
    9 Real-time定量PCR分析
    10 Western-blot分析
    11 免疫组化学分析
    12 统计学分析
结果
    1 肝细胞癌样本Real-time PCR分析Fanci癌基因表达情况
    2 Western-blot分析证实肝细胞癌样本Fanci基因高表达
    3 筛选与FANCI基因高表达的阳性肝细胞癌细胞株
    4 FANCI基因表达与肝细胞癌患者预后的关系
    5 免疫组化检测显示FANCI基因在肝细胞癌组织中高表达
    6 基因敲减FANCI基因抑制肝癌细胞增殖
    7 FANCI基因敲除降低肝癌细胞克隆形成能力
    8 FANCI基因敲减抑制肝癌细胞的迁移和侵袭
    9 FANCI基因敲减促进肝癌细胞凋亡
    10 FANCI基因敲减抑制肝癌细胞裸鼠成瘤
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3734455