miR-486-5p靶向SIRT1抑制肝癌干细胞功能的相关研究

发布时间：2023-02-07 22:18

　　肿瘤组织中的肿瘤细胞并不是均一的群体,其中存在一小部分细胞,这一小部分的细胞具有自我更新并产生异质性肿瘤的能力,表现出干细胞样特性,被称为肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)[1]。肿瘤干细胞的发现为阐明肿瘤的复发、转移和耐药提供了理论依据[2]。许多研究提示肿瘤干细胞可能是肿瘤发生、复发、转移和耐药的根源,探索肿瘤干细胞的作用和调控机制,有望为开发靶向肿瘤干细胞的新的治疗手段奠定基础。微小RNA(micoRNA,miRNA)是一类非编码的小分子RNA,长度约为19-22个核苷酸的小分子[3]。miRNA由具有发夹结构的大小约为70-90nt的单链前体经过Dicer酶进行剪切加工生成,其通过与靶基因的3’非编码区(3’untranslate region,3’UTR)碱性互补配对相结合,可以特异性抑制或降解靶基因的mRNA,进而抑制靶基因的翻译,调节靶基因的表达[3,4]。越来越多的证据表明,micoRNA在许多肿瘤中表达异常,能够参与肿瘤的形成、生长、转移、复发和耐药等,其中一些miRNAs与肝癌干细胞特性维持有着密切的联系[5,6]。因此,寻找在肝癌干细胞和肝癌非...

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
个人简历
摘要
Abstract
前言
第一部分 筛选及验证肝癌干细胞中表达显著下调的miRNA
    前言
    材料与方法
        1. 实验材料
        2. 实验方法
    实验结果
        1.TCGA数据库筛选肝癌组织中表达下调显著的miRNA
        2. 筛选肝癌干细胞中中表达下调显著特异的miRNA
        3.验证miR-486-5p在肝癌和肝癌细胞中的表达情况
    讨论
第二部分 miR4865p对肝癌干细胞生物学特性的影响
    前言
    材料和方法
        1. 实验材料
        2. 实验方法
    实验结果
        1 miR4865p抑制肝癌干细胞的增殖和成瘤能力
        2. miR4865p抑制肝癌干细胞的干性
        3. miR4865p体外抑制肝癌干细胞的侵袭和迁移
        4.miR-486-5p对肝癌细胞耐药性的影响
第三部分 miR4865p靶基因的筛选和鉴定
    前言
    材料与方法
        1. 材料
        2. 实验方法
    实验结果
        1. miR4865p靶基因筛选
        2. 荧光定量RT-PCR筛选mi R4865P的靶基因
        3. 在肝癌组织中验证SIRT1是miR4865p的靶基因
        4. 双荧光素酶报告实验证实SIRT1是miR4865p的靶基因
    讨论
第四部分 SIRT1对肝癌干细胞生物学特性的影响
    前言
    材料与方法
        1. 实验材料
        2. 实验方法
    实验结果
        1. SIRT1慢病毒干涉载体的构建
        2. 构建稳定RNA干涉SIRT1（shSIRT1）的肝癌细胞系
        3.SIRT1对肝癌细胞增殖能力的影响
        4. SIRT1对肝癌细胞耐药性的影响
    讨论
全文小结
Reference
附录
缩略词表
综述 MicoRNA调节肝癌干细胞的功能及机制的研究
    参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的成果
论文全文



本文编号：3737522