锌转运体ZNT1在膀胱癌中的表达意义及发生发展中的影响机制

发布时间：2023-02-11 10:23

　　目的:膀胱癌是人类常见的恶性肿瘤之一,在世界范围内,其在男性中的发生率位居第6,女性则为第16[1,2],常见的95%以上的膀胱癌为尿路移行上皮肿瘤。因其多中心和多器官的发病特点,该病在治疗后易复发。虽然国内外专家学者对膀胱癌进行了广泛的临床和实验研究,仍尚不清楚其发病机理,可以确定的是膀胱癌的发生与发展是多因素作用的结果。当前阶段仍很难对肿瘤患者做到疗效监测以及预后评价。目前有研究发现人体的血锌以及尿锌的含量与膀胱癌的发生发展密切相关,以上的研究结果表明锌的代谢在膀胱癌患者中可能存在异常,肌层浸润性膀胱癌患者的尿锌含量要高于非肌层浸润性膀胱癌患者以及健康人群,研究同时发现肿瘤组织内的锌含量在膀胱癌发生的早期已经发生了下降,我们据此推测在膀胱癌的发生发展过程中,锌的转运可能起到了关键的作用。人体内有200多种酶具有锌指结构,同时锌也是转录因子保持活性并参与细胞结构组成及催化活性的关键元素,是人体必须的微量营养元素之一[3,4]。诸多研究表明发育迟缓、DNA合成受损、免疫功能缺陷、皮肌炎等疾病均与锌缺乏有关,当前研究进一步显示在缺氧、血管生成、细胞增殖和肿瘤转移中,锌相关的一些酶扮有重要...

【文章页数】：59 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 ZNT1在膀胱癌组织中的表达及临床意义
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料与主要试剂、仪器
            2.1.1 标本
            2.1.2 主要试剂及溶液配制
            2.1.3 实验仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 免疫组化(SP法)
            2.2.2 Real-Time RTPCR
            2.2.3 Western Blot
    3 统计方法
    4 实验结果
        4.1 免疫组化
        4.2 Real Time RT-PCR
        4.3 Western Blot
    5 讨论
    6 结论
第二部分 siRNA干扰ZNT1表达对膀胱癌BIU87细胞株生物学行为的影响
    1 前言
    2 材料、仪器和方法
        2.1 材料
            2.1.1 细胞株
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 D-Hank's液配置
            2.2.2 0.25%胰酶配制
            2.2.3 细胞冻存液配制
            2.2.4 HEPES液配制
            2.2.5 MTT溶液的配制
            2.2.6 细胞培养,传代和冻存
            2.2.7 免疫荧光方法检测膀胱癌细胞系中ZNT1蛋白的亚细胞定位情况
            2.2.8 瞬时转染
            2.2.9 MTT实验
            2.2.10 侵袭实验
            2.2.11 划痕实验
    3 统计方法
    4 实验结果
        4.1 ZNT1蛋白在不同膀胱细胞系中的表达情况
            4.1.1 免疫荧光方法检测不同膀胱细胞系中ZNT1蛋白的定位情况
            4.1.2 ZNT1 mRNA在膀胱细胞SV-HUC-Ⅰ、BIU87,T24,5637中的表达情况
            4.1.3 ZNT1蛋白在4种膀胱细胞系中的表达情况
        4.2 使用三组ZnT1 siRNA序列转染24小时后检测其对BIU87细胞ZNT1mRNA抑制情况
        4.3 转染48小时后检测ZNT1蛋白的表达
        4.4 MTT检测ZNT1-siRNA对细胞增殖的影响
        4.5 侵袭实验
        4.6 细胞划痕实验
    5 讨论
    6 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简介



本文编号：3740203