miR-34a在前列腺癌中的高度甲基化对ATG4B表达水平影响的研究

发布时间：2023-02-26 06:34

　　目的:本研究将使用MSP或BSP检测前列腺癌组织、正常前列腺组织与前列腺癌细胞系(PC-3、DU145)及正常人前列腺上皮细胞(RWPE-1)中miR-34a的启动子区甲基化水平;通过QPCR检测获取前列腺癌细胞系经抑制甲基化处理前后的miR-34a及ATG4B的表达水平;通过双荧光素酶报告基因检测miR-34a与ATG4B在前列腺癌细胞中是否存在直接靶向性关系。以期为前列腺化疗提供新的理论基础及基因治疗提供新的靶点。方法:第一部分,内源检测:1、收集前列腺癌组织与正常组织各25例,MSP检测miR-34a启动子甲基化状态;2、QPCR检测癌症组织与癌旁组织中miR-34a的mRNA表达水平;3、MSP检测前列腺癌细胞系(PC-3、DU145)及正常人前列腺上皮细胞(RWPE-1)中miR-34a的启动子区甲基化状态;4、QPCR 检测 RWPE-1、PC-3、DU145 中 miR-34a、ATG4B 的 mRNA 表达水平。第二部分,靶基因验证:1、甲基化抑制剂5’-杂氮脱氧胞苷处理PC-3、DU145两株前列腺癌细胞系(时间:48h浓度:10umol/L);2、miR-34a的模...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
英文摘要
主要缩略语表
第一章 前言
第二章 材料与方法
    1. 材料、细胞培养及MTT检测前列腺癌细胞的生长
    2. MSP检测miR-34a启动子甲基化状态
    3. Real-time PCR检测
    4. Western Blot检测凋亡相关蛋白及自噬相关蛋白的表达
    5. 双萤光素酶实验检测miR-34a是否靶向作用于ATG4B
    6. 统计学处理
第三章 实验结果
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
读研期间主要研究成果
致谢



本文编号：3750014