MACF1在胃癌中的表达及CRISPR/Cas9敲除MACF1对胃癌体外生物学行为的影响

发布时间：2023-03-04 06:08

　　胃癌(gastric cancer,GC)是全球死亡率第二位的恶性肿瘤,胃癌的发病率高,治疗效果差,根治率低,在消化道肿瘤中发病率和死亡率占第一位,是危害人类健康的主要恶性肿瘤之一。全球42%的胃癌患者发生在中国,每年新发病例数仅次于日本位居世界第二,并有逐年上升趋势。尽管随着手术、化疗、放疗和分子靶向治疗技术的发展和综合治疗的应用,延长了部分早期胃癌患者的生存期,但晚期胃癌5年生存率仅10%-20%,中位生存时间不超过1年。因此对于胃癌的现况应该引起足够的重视,而胃癌的发生机制的研究对于指导胃癌治疗至关重要。肿瘤的发生发展是一个多步骤,多基因参与的过程,包括遗传学和表观遗传学的改变。但是由于技术的限制,很多机制尚未阐明。随着基因测序和编辑技术的出现和发展,包括全基因组测序,转录组测序,外显子测序,以及CRISPR/Cas9等基因打靶技术,从基因和分子水平更好的了解肿瘤的发生。MACFl作为一种细胞骨架连接因子,可以与细胞骨架组分微丝微管相结合,并在细胞的生长发育以及维持组织结构完整性中发挥相当作用。MACFl是一种细胞骨架交联因子,同时也是首个被认为表达范围广泛并且能够结合微丝微管细...

【文章页数】：148 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩写词对照表
前言
    参考文献
第一部分 MACF1在胃癌中的表达情况及与临床预后之间的关系
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
    参考文献
第二部分 CRISPR/Cas9靶向敲除MACF1基因改造胃癌细胞系
    第一章 Q-PCR和Westernblot筛选高表达胃癌细胞系
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
    第二章 MACF1 CRISPR/Cas9质粒载体构建
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
    第三章 gRNA和Reporter质粒转染JH293细胞并筛选
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
    第四章 转染目的胃癌细胞并流式分选单克隆培养
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
    第五章 MACF1基因敲除成功的胃癌AGS/SNU-1 细胞系的筛选及鉴定
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 讨论
        5 小结
    参考文献
第三部分 MACF1基因敲除对胃癌AGS细胞系体外生物学行为的影响
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
    参考文献
结论
综述
    综述一 MACF1及斑蛋白家族的结构功能和在疾病发生发展中的作用
    综述二 CRISPR-Cas9基因靶向修饰技术
    参考文献
个人简历
攻读博士学位期间发表文章及参与课题
致谢



本文编号：3753858