RNase A对人非小细胞肺癌A549细胞生物学行为和功能的影响

发布时间：2023-03-28 17:37

　　目的:恶性肿瘤是威胁人类生命健康的重大疾病,传统的手术治疗、化学药物疗法、放射疗法和免疫疗法等虽然各有优势,但在应用中也存在诸多局限,并不能完全满足需要。因此,开发特异性好和疗效高的抗肿瘤药物仍然十分必要。RNase作为一类广泛存在的具有细胞毒性作用的天然酶类,逐渐显示出作为抗肿瘤药物的潜力。已有研究表明在不同条件下不同的RNase具有促癌或者抑癌的多重作用,但是其具体功能机制尚有待进一步阐明。为此,本文以人非小细胞肺癌A549细胞为模型,深入研究RNase A对A549细胞不同生物学行为和功能的影响,揭示其作用机制,为研发基于RNase的抗癌药物提供理论基础。此外,本文初步研究了RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响,以期为进一步阐释RNase A与细菌感染间的关系提供基础。方法:1.RNase A对A549细胞生物学行为和功能的影响:1)分别通过光学显微镜和激光共聚焦扫描显微镜观察RNase A处理对A549细胞形态的影响。2)通过Transwell法检测不同浓度RNase A处理对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。3)利用细胞球形成实验检测不同浓度RNase A处理对A549...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语
中文摘要
Abstract
第一章 RNase A对人非小细胞肺癌A549 细胞生物学行为和功能的影响
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 细胞系
            2.1.2 主要试剂与材料
            2.1.3 主要仪器
            2.1.4 溶液配制
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 显微镜观察RNase A处理A549 细胞生长状态
            2.2.3 激光共聚焦显微镜观察RNase A处理A549细胞表面伪足变化
            2.2.4 Transwell法检测RNase A处理A549 细胞迁移能力
            2.2.5 Transwell结合基质胶法检测RNase A处理A549 细胞侵袭能力
            2.2.6 细胞成球实验检测RNase A处理A549细胞球形成能力
            2.2.7 CCK-8 法检测RNase A处理A549 细胞增殖水平
            2.2.8 CCK-8 法检测RNase A联合阿霉素处理A549 细胞增殖水平
            2.2.9 CCK-8 法检测RNase A联合顺铂处理A549 细胞增殖水平
            2.2.10 统计学分析
    3 实验结果
        3.1 RNase A促进A549 细胞呈生长离散状态
        3.2 RNase A促进A549 细胞表面伪足增加
        3.3 RNase A促进A549 细胞迁移能力
        3.4 RNase A促进A549 细胞侵袭能力
        3.5 RNase A抑制A549 细胞球形成
        3.6 RNase A对 A549 细胞增殖水平的影响
        3.7 RNase A联合化疗药物对A549 细胞的杀伤作用
    4 讨论
    5 小结
第二章 RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 菌株
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要仪器
            2.1.4 溶液配制
        2.2 实验方法
            2.2.1 菌体活化与种子液制备
            2.2.2 不同浓度RNase A处理LB和 M9 培养基培养大肠杆菌DH5α
            2.2.3 RNase A预处理LB培养基培养大肠杆菌DH5α
            2.2.4 RNase A处理大肠杆菌DH5α在LB固体培养基培养菌落
    3 实验结果
        3.1 RNase A促进大肠杆菌DH5α在LB和 M9 培养基中的增殖
        3.2 RNase A不同处理方式对大肠杆菌DH5α在LB培养基中增殖的影响
        3.3 RNase A处理促进大肠杆菌菌落形成
    4 讨论
    5 小结
总结
参考文献
附录 个人简历
致谢
综述 RNase的肿瘤杀伤作用
    参考文献



本文编号：3772973