TIP60 SUMO2/3修饰通过调节DNA-PKcs活性调控DNA损伤修复

发布时间：2023-03-28 22:49

　　研究目的:在肿瘤的治疗中,放疗和很多化疗药物都可引起DNA双链断裂损伤。靶向肿瘤细胞的DNA修复功能,使DNA损伤在放化疗后得不到完整修复,从而诱导肿瘤细胞程序性死亡,是临床上治疗肿瘤的常用方法。因此针对DNA损伤修复机制进行深入研究,对指导我们在肿瘤精准化个体治疗的临床实践中有着重要意义。当基因组DNA发生双链断裂后,Ku70/80可以迅速识别并结合到断裂位点,然后招募并激活DNA-PKcs。DNA-PKcs的激活对于有效的NHEJ以及DSBs修复至关重要。TIP60是一种在真核生物中高度保守的乙酰基转移酶,当细胞发生DNA损伤时,TIP60可通过其乙酰基转移酶活性促进DNA-PKcs的激活,但是TIP60调控DNA-PKcs活性的具体机制还不清楚。在本项研究中,我们希望通过对TIP60SUMO2/3修饰调节DNA-PKcs活性的具体机制进行深入探索,加深人们对TIP60以及DNA-PKcs在DNA损伤应答中功能的了解,并为今后肿瘤的精准治疗提供参考信息以及新的药物靶标。研究方法:(1)293T细胞内分别共转染His-SUMO2/3与Myc-TIP60,并设置His-vector与M...

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
前言
第一章 材料与方法
    第一节 实验材料
    第二节 实验方法
第二章 TIP60的SUMO2/3 修饰位点以及E3,de-SUMO酶的研究
    第一节 引言
    第二节 实验结果
        2.2.1 TIP60 可被SUMO2/3 修饰
        2.2.2 PIAS4 介导TIP60 K430 位点的SUMO2/3 修饰
        2.2.3 SENP3 介导TIP60去SUMO2/3 修饰
    第三节 本章小结
第三章 DNA损伤以及细胞周期对TIP60 SUMO2/3 修饰的调控作用研究
    第一节 引言
    第二节 实验结果
        3.2.1 TIP60的SUMO2/3 修饰在S期增高
        3.2.2 TIP60 SUMO2/3 修饰在照射后迅速降低
    第三节 本章小结
第四章 TIP60 SUMO2/3 化修饰调控其与DNA-PKcs相互作用
    第一节 引言
    第二节 实验结果
        4.2.1 TIP60与DNA-PKcs相互作用结构域的研究
        4.2.2 TIP60与DNA-PKcs的相互作用在DNA损伤后增加
        4.2.3 TIP60与DNA-PKcs相互作用在S期减弱
        4.2.4 TIP60 SUMO2/3 修饰抑制其与DNA-PKcs相互作用
    第三节 本章小结
第五章 TIP60 K430R突变对DNA损伤修复以及细胞DNA损伤敏感性的影响
    第一节 引言
    第二节 实验结果
        5.2.1 TIP60 K430R 突变抑制 DNA 损伤双链断裂修复
        5.2.2 TIP60 K430R突变增加细胞的DNA损伤敏感性
    第三节 本章小结
第六章 讨论与展望
参考文献
附录 实验使用核酸序列信息
作者在学期间取得的学术成果
简历
致谢



本文编号：3773445