CAF来源的exosome促进前列腺癌细胞上皮间质转化

发布时间：2023-04-11 23:36

　　研究目的利用前列腺癌肿瘤相关成纤维细胞(CAF)与正常成纤维细胞(NF)分泌的exosome分别处理肿瘤细胞,初步探讨CAF来源的exosome及其所含的特定生物分子在前列腺癌细胞发生上皮间充质转化(EMT)中的作用。研究方法(1)利用Western Blot和细胞免疫荧光(IF)的方法鉴定CAF与NF,并提取CAF与NF的条件培养基处理前列腺肿瘤细胞,Western Blot验证不同培养基对肿瘤细胞的影响。(2)利用超高速梯度离心技术提取CAF与NF条件培养基中的exosome,并使用透射电子显微镜对其进行鉴定。(3)利用PKH-67对CAF及NF分泌exosome进行染色,IF下观察肿瘤细胞对exosome的摄取情况。(4)利用Transwell migration assay,Western Blot和IF分析exosome对前列腺肿瘤细胞迁移作用及EMT的影响。(5)查阅相关文献及数据库,初步鉴定可能引起上述作用的mi RNA,利用RT-PCR及q PCR进行分析及定量,利用mi RNA抑制剂处理CAF及NF后重复上述实验,并通过Transwell migration assa...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1 对象和方法
    1.1 实验对象
    1.2 实验试剂及仪器
    1.3 实验方法
2 结果
    2.1 鉴定肿瘤相关成纤维细胞（CAF）与正常成纤维细胞（NF）
    2.2 CAF及NF条件培养基对前列腺肿瘤细胞EMT转化的影响
    2.3 鉴定exosome
    2.4 IF检测前列腺肿瘤细胞吸收exosome情况
    2.5 Exosome对前列腺肿瘤细胞迁移能力的影响
    2.6 Exosome对前列腺肿瘤细胞EMT转化的影响
    2.7 通过文献及数据库查找相关miRNA并验证表达情况
    2.8 PCR检测四种miRNA在exosome中表达情况
    2.9 摄取exosome后前列腺肿瘤细胞内miRNA水平变化情况
    2.10 MiRNA inhibitor处理后相关miRNA的表达水平
    2.11 MiRNA inhibitor处理后CAF exosome对前列腺肿瘤细胞EMT的影响
    2.12 MiRNA inhibitor处理后CAF exosome对前列腺肿瘤细胞迁移能力的影响
3.讨论
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 外泌体在恶性肿瘤进展中的作用及诊疗意义
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3789978