叶酸偶联大分子前药自组装纳米颗粒用于肝癌精准治疗

发布时间：2023-05-03 18:39

　　由于具有被动靶向或单个配体主动靶向特性的纳米颗粒(nanoparticles,NPs)的靶向效率不理想,肝细胞癌的有效治疗(hepatocellular carcinoma,HCC)仍然面临着巨大的挑战。尽管基于双配体靶向机制的策略在一定程度上可以提高HCC靶向效率,但是大多数报道的具有双配体靶向性质的NPs通常都需要经历多步化学设计、合成和纯化程序,导致批次间差异和可扩展性生产方面的困难。因此,针对HCC的精准治疗和潜在的临床转化,亟需开发一种简便而有效的双配体靶向NPs,本文中,将叶酸(folic acid,FA)作为疏水性和靶向性片段引入亲水性大分子前药半乳糖基化壳聚糖-5-氟尿嘧啶乙酸(GC-FU)中,合成FA-GC-FU聚合物前药。该聚合物前药可以由FA和聚合物部分的溶解度差异驱动其在水相中自组装形成NPs,而无需使用物理交联剂用于自组装。所制备的纳米颗粒(FA-GC-FU)可以分别通过NPs表面上的FA和乳糖酸(lactobionic acid,LA)残基靶向HCC细胞表面上过表达的去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)和叶...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩写词索引
第1章 绪论
    1.1 肝癌研究的进展
    1.2 大分子前药
    1.3 靶向纳米药物递送系统
        1.3.1 双配体靶向纳米药物
        1.3.2 叶酸受体(folate receptor,FR)介导的靶向纳米药物
    1.4 本课题的研究思路和创新点
第2章 FA-GC-FU靶向纳米药物的制备与理化性质表征
    2.1 主要材料、试剂与仪器
        2.1.1 主要材料与试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 FA-GC-FU的制备
        2.2.2 叶酸偶联比计算
        2.2.3 FA-GC-FU的1H-NMR测定
        2.2.4 FA-GC-FU的粒径与Zeta电位测定
        2.2.5 FA-GC-FU的形貌特征研究
        2.2.6 FA-GC-FU的载药量测定
        2.2.7 FA-GC-FU的稳定性考察
        2.2.8 FA-GC-FU的体外药物释放特性研究
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 FA-GC-FU的叶酸偶联比检测
        2.3.2 FA-GC-FU的1H-NMR分析
        2.3.3 FA-GC-FU的粒径和Zeta电位测定
        2.3.4 FA-GC-FU的形貌特征分析
        2.3.5 FA-GC-FU的载药量测定
        2.3.6 FA-GC-FU的稳定性考察
        2.3.7 FA-GC-FU的体外药物释放特性研究
        2.3.8 讨论
第3章 FA-GC-FU靶向纳米药物体外生物相容性评价
    3.1 主要材料、试剂与仪器
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 主要材料与试剂
        3.1.3 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养
        3.2.2 FA-GC-FU对L02靶向纳米药物的制备与理化性质表征
        3.2.3 BSA吸附实验
        3.2.4 溶血实验
        3.2.5 数据统计学分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 FA-GC-FU对 L02 细胞和HUVEC细胞存活率的影响
        3.3.2 FA-GC-FU的 BSA吸附率评价
        3.3.3 FA-GC-FU溶血实验检测
        3.3.4 讨论
第4章 FA-GC-FU靶向纳米药物的体外抗肿瘤作用及其靶向性研究
    4.1 主要材料、试剂与仪器
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 主要材料与试剂
        4.1.3 主要仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 MTT法检测FA-GC-FU靶向纳米药物的制备与理化性质表征
        4.2.2 竞争结合实验(MTT法)
        4.2.3 FA-GC-FU的细胞摄取研究
        4.2.4 FA-GC-FU对肝癌细胞细胞凋亡的影响
        4.2.5 FA-GC-FU对肝癌细胞细胞周期的影响
        4.2.6 FA-GC-FU对肝癌细胞体外抗转移能力研究
        4.2.7 数据统计学分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 MTT法检测FA-GC-FU对肝癌细胞增殖抑制的影响
        4.3.2 竞争结合实验(MTT法)
        4.3.3 FA-GC-FU的细胞摄取研究
        4.3.4 FA-GC-FU对肝癌细胞细胞凋亡和细胞周期的影响
        4.3.5 FA-GC-FU对肝癌细胞体外抗转移能力研究
        4.3.6 讨论
第5章 FA-GC-FU靶向纳米药物的体内抗肿瘤作用及毒性研究
    5.1 主要材料、试剂与仪器
        5.1.1 主要材料与试剂
        5.1.2 主要仪器
    5.2 实验方法
        5.2.1 荷瘤裸鼠肿瘤模型的建立
        5.2.2 体内抗肿瘤效果评价及毒性研究
        5.2.3 器官损伤实验
        5.2.4 数据统计学分析
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 体内抗肿瘤作用评价
        5.3.2 器官损伤研究
        5.3.4 讨论
第6章 结论
参考文献
综述
    Reference
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：3807070