SERPINA3低表达对GES1细胞生长增殖的影响

发布时间：2023-05-26 21:47

　　目的:课题组前期运用蛋白质组学方法筛选鉴定丝氨酸蛋白酶抑制蛋白A3(SERPINA3)在胃粘膜癌变过程中表达下调,了解其在胃粘膜癌变过程中的功能,将为阐明胃粘膜癌变的分子机制提供理论依据。方法:1、构建SERPINA3干扰载体,转染GES1细胞,筛选后建立SERPINA3低表达GES1细胞系(GES1-miR-SERPINA3);2、采用免疫荧光和Western-blot方法检测GES1-miR-SERPINA3细胞中SERPINA3蛋白的表达情况;3、通过绘制细胞生长曲线、软琼脂集落形成实验、平皿克隆形成实验和流式细胞仪等方法,观察SERPINA3低表达对GES1细胞生长增殖的影响。4、Western-blot检测GES1-miR-SERPINA3细胞中Wnt1与β-catenin的表达。结果:1、GES1-miR-SERPINA3细胞的生长速度较对照组细胞(GES1与GES1-pcDNA6.2)明显加快(P<0.01),细胞生长曲线结果说明,SERPINA3低表达后GES1细胞生长能力增强;2、GES1、GES1-pcDNA6.2与GES1-miR-SERPINA3细胞克隆数...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要缩略语英文索引
第1章 前言
技术路线
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞系
        2.1.2 菌株和质粒
        2.1.3 引物
        2.1.4 主要试剂
        2.1.5 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 基因转染
        2.2.3 免疫荧光
        2.2.4 Western-blot检测
        2.2.5 细胞生长曲线
        2.2.6 平皿克隆形成实验
        2.2.7 软琼脂集落形成实验
        2.2.8 流式细胞仪(FCM)检测
        2.2.9 统计学分析
第3章 实验结果
    3.1 建立SERPINA3 低表达GES1 细胞系
    3.2 SERPINA3 低表达对GES1 细胞生长的影响
    3.3 SERPINA3 低表达对GES1 细胞克隆形成的影响
    3.4 SERPINA3 低表达对GES1 细胞集落形成的影响
    3.5 SERPINA3 低表达对GES1 细胞周期分布的影响
    3.6 SERPINA3 低表达对GES1 细胞凋亡的影响
    3.7 SERPINA3 低表达对Wnt1/β-catenin通路的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者攻读学位期间发表的科研论文
致谢



本文编号：3823315