基于新型电化学活性开关分子信标对肿瘤细胞的检测

发布时间：2023-05-27 06:13

　　癌症是一种非常可怕的疾病,对人类的生活和社会的发展都有一定的影响,每年都会有数百万人因此失去生命,且逐年递增。为了提高癌症患者的生存率,对癌症的早期诊断尤为重要。因此,研究人员将重心放在了对肿瘤标志物的超灵敏早期检测,从而诊断肿瘤细胞上。然而,由于假阴性或阳性结果的存在,仅检测一种肿瘤标志物容易引起误诊,所以同时检测两种或两种以上的标志物就具有十分重要的意义。近年来,越来越多的研究着眼于对肿瘤细胞的早期检测,并开发创新了许多强大的监测平台,简化分析过程,提高灵敏度、保持稳定性和广泛适用性等方面的基本优势。例如实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR),酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)微阵列分析(microarray analysis),荧光分析(fluorescence analysis)等,但这些方法需要复杂的操作程序、昂贵的仪器和专业的操作人员。目前,电化学分析(electrochemical analysis)中的分子信标技术因其快速且便携,仪器简单,成本...

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
内容摘要
Abstract
试剂列表
仪器列表
第一章 绪论
    1 癌症及其诊断
        1.1 癌症
        1.2 癌症的诊断
        1.3 肿瘤标志物在癌症检测中的意义
    2 分子信标及其对肿瘤标志物检测的研究
        2.1 分子信标
        2.2 新型电化学活性开关分子信标的应用
        2.3 分子信标对肿瘤标志物检测的研究
    3 信号扩增技术的研究
        3.1.链置换扩增技术
        3.2.滚环扩增技术
        3.3.酶的信号扩增技术
        3.4.无酶信号扩增技术
    4 多目标/多信号生物传感器的研究
        4.1.多目标生物传感器
        4.2.多信号生物传感器
    5 本论文的研究意义和主要内容
    参考文献
第二章 分裂引物连接诱导分子信标构象的改变用于高特异性检测肝癌细胞的相关mRNA:TK1(胸苷激酶1)和c-myc(原癌基因)
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 电化学检测体系
        2.2.2 DNA的合成
        2.2.3 二茂铁分子信标的合成
        2.2.4 连接反应
        2.2.5 凝胶电泳
        2.2.6 检测HepG2和HL-7702细胞中TK1和c-myc
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 TK1和c-myc mRNA检测的传感机理
        2.3.2 分裂引物连接诱导分子信标构象改变的可行性
        2.3.3 条件优化实验
        2.3.4 Tk1和c-myc的定量检测
        2.3.5 传感器的特异性
        2.3.6 对肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(HL-7702)的检测
    2.4 结论
    参考文献
第三章 分裂引物连接触发8-17酶辅助级联滚环扩增用于高效特异性检测肝癌细胞的相关mRNA:胸苷激酶1(TK1)和原癌基因(c-myc)
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 电化学检测体系
        3.2.2 DNA的合成
        3.2.3 二茂铁分子信标的合成
        3.2.4 连接反应
        3.2.5 滚换扩增反应
        3.2.6 凝胶电泳
        3.2.7 检测HepG2和HL-7702细胞中TK1和c-myc
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 TK1和c-myc mRNA检测的传感机理
        3.3.2 分裂引物连接诱导的8-17 DNAzyme辅助级联滚环扩增的可行性
        3.3.3 条件优化实验
        3.3.4 Tk1和c-myc的定量检测
        3.3.5 传感器的特异性
        3.3.6 对肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(HL-7702)的检测
    3.4 结论
    参考文献
第四章 基于分裂引物连接触发催化发夹自组装反应的双信号电化学传感器对癌细胞的检测
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 电化学检测体系
        4.2.2 DNA的合成
        4.2.3 二茂铁分子信标的合成
        4.2.4 连接反应
        4.2.5 催化发夹白组装反应
        4.2.6 凝胶电泳
        4.2.7 检测HepG2,HL-7702,MCF-7和MCF-10A细胞中的mRNA
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 TK1和c-myc mRNA检测的传感机理
        4.3.2 分裂引物连接诱导催化发夹自组装反应的可行性
        4.3.3 条件优化实验
        4.3.4 两组癌症标志物的定量检测
        4.3.5 传感器的特异性
        4.3.6 对四种细胞实样的检测
        4.3.7 建立对于四种细胞检测的逻辑门
    4.4 结论
    参考文献
第五章 基于空间阻滞和分子信标构象改变用于高特异性检测肝癌细胞的相关mRNA: TK1(胸苷激酶1)和c-myc(原癌基因)
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 电化学检测体系
        5.2.2 DNA的合成
        5.2.3 二茂铁分子信标的合成
        5.2.4 电极的组装
        5.2.5 检测HepG2和HL-7702细胞中TK1和c-myc
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 TK1和c-myc mRNA检测的传感机理
        5.3.2 基于空间阻滞和分子信标构象改变诱导电化学信号改变的可行性
        5.3.3 条件优化实验
        5.3.4 Tk1和c-myc的定量检测
        5.3.5 传感器的特异性
        5.3.6 对肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(HL-7702)的检测
    5.4 结论
    参考文献
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
附录 博士期间科研成果
致谢



本文编号：3824049