Lin28B/let-7通路与肝癌细胞紫杉醇耐药的相关性研究

发布时间：2023-05-30 20:14

　　为证明Lin28B/let-7通路与肝癌紫杉醇耐药密切相关和采用浓度梯度间歇刺激法建立Hep3B/PTX耐药细胞系。通过四甲基偶氮唑盐比色(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分析Guava微流式分析对Hep3B/PTX耐药细胞系进行鉴定,realtime PCR检测耐药细胞中Lin28B及let-7表达水平。经过6个月的诱导,Hep3B/PTX耐药细胞系对紫杉醇的耐药指数为13.55;与亲本细胞相比,Hep3B/PTX处于G0/G1期的细胞比例较高,S期的细胞比例较低;0.2μmol/L紫杉醇处理亲本细胞24h后,有(41.73±1.80)%细胞发生凋亡,而Hep3B/PTX细胞凋亡率只有(17.21±3.60)%;real-time PCR发现,Hep3B/PTX与亲本细胞相比,Lin28B基因表达水平升高了49倍,而Lin28B调控的let-7家族成员表达水平均有不同程度的降低。Hep3B/PTX细胞中Lin28B基因和let-7家族成员表达量的变化揭示了肝癌细胞对紫杉醇的耐药与Lin28B/let-7通路相关,Lin28B基因可能通过影响let-7...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 药物与试剂
    1.2 耐药细胞系的筛选
    1.3 MTT法检测紫杉醇对Hep3B/PTX细胞增殖的IC50
    1.4 Guava easyCyte Flow Cytometers检测细胞周期
    1.5 Guava easyCyte Flow Cytometers检测细胞凋亡
    1.6 real-time PCR检测Lin28B基因的表达
    1.7 real-time PCR检测let-7家族的表达
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 人肝癌耐药细胞系Hep3B/PTX的建立
    2.2 Hep3B与Hep3B/PTX的细胞周期检测
    2.3 紫杉醇诱导的Hep3B及Hep3B/PTX细胞凋亡检测
    2.4 Lin28B基因在Hep3B/PTX细胞中的表达
    2.5 Hep3B和Hep3B/PTX细胞中let-7家族各成员表达的差异
3 讨论
4 结论



本文编号：3824962