1、MiR-34c/CTNND1信号通路是化疗药物抑制肝癌进展的重要靶点 2、RNA结合蛋白DCAF13/TDRKH在肝

发布时间：2024-07-09 02:37

　　原发性肝细胞癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,起病隐匿,多数患者确诊时已达中晚期,已不适合行根治性手术治疗,预后很差。肝动脉化疗栓塞术(Transcatheter arterial chemoembolization,TACE)和肝动脉灌注化疗(Hepatic arterial infusion chemotherapy,HAIC)在中晚期肝癌的治疗中占有重要地位,但其疗效在不同个体间的差异很大,而且化疗药物在肝癌中具体的作用机制仍不清晰。本课题中,我们首先发现,化疗药物氟尿嘧啶和吡柔比星可以激活SMMC-7721 和 PLC/PRF/5 这两株肝癌细胞系中 miR-34a,miR-34b 及 miR-34c 的表达。随后,我们在肝癌细胞系中过表达miR-34s后进行了细胞增殖、迁移及侵袭表型实验的研究,结果显示,miR-34s可以有效抑制肝癌细胞的增殖及侵袭转移。上述体外研究结果也在裸鼠皮下成瘤、尾静脉转移等动物体内实验中得到了证实。应用生物信息学、蛋白质免疫印迹及双荧光素酶报告基因实验,我们发现并验证了miR-34s的一个关键靶基因,即CTNND1。我们发现,敲低CTNND1的表达可...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１氟尿嘧啶和吡柔比星可以激活肝癌细胞系中ｍｉＲ－３４ｓ的表达

胞系中的半抑制浓度（ｈａｌｆ?ｍａｘｉｍａｌ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，?ＩＣ５０），结果??显示氟尿嘧啶在ＳＭＭＣ－７７２１和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５的ＩＣ５０分别为５７．?５１和４２．?９５ｕＭ，而吡柔比??星则分别为５４．?５２和９５．?５５ｎＭ?（图１Ａ....

图２实时荧光定量ＰＣＲ检测ｍｉＲ－３４ｓ?ｍｉｍｉｃｓ在ＰＬＣ／ＰＲＦ／５和ＳＭＭＣ－７７２１中的过表达效??

为了实现ｍｉＲ＿３４ｓ在肝癌细胞系中的过表达，我们应用人工合成的ｍｉＲ－３４ｓ模??拟物（ｍｉｍｉｃｓ），以及阴性对照（Ｓｃｒａｍｂｌｅ），转染ＳＭＭＣ－７７２１?和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５细??胞。如图２所示，Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ结果表明，ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ....

图３过表达ｍｉＲ－３４ｓ对肝癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

我们在ＳＭＭＣ－７７２１和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５细胞系中转染ｍｉＲ－３４ｓ模拟物和阴性对照２４小时??后，将细胞重新铺到９６孔板，并在铺板后０小时、２４小时、４８小时、７２小时和９６小??时利用ＣＣＫ８试剂盒测定细胞活力，如图３Ａ所示，过表达ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ－?....

图４过表达ｍｉＲ－３４ｓ对肝癌细胞裸鼠皮下成瘤的影响

??图４Ａ所示，我们发现，过表达ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ－３４ｃ可以明显抑制肝癌细胞??在裸鼠皮下的成瘤能力，其瘤块的体积和重量均明显小于阴性对照组。同时，??ＫＩ６７及Ｃａｓｐａｓｅ?３染色结果也表明，过表达ｍｉＲ＿３４ｓ可以在动物实验水平促进调??亡，抑制增殖（....

本文编号：4004260