OXCT1活化NF-κB通路促进非小细胞肺癌细胞的生长和迁移

发布时间：2023-08-04 18:37

　　肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,对人类的健康造成极大的威胁。肺癌可分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC),而非小细胞肺癌约占肺癌的80%-85%,所以寻找新型的非小细胞肺癌靶点刻不容缓。酮体,由肝脏产生,由血液运输到身体的其他组织和器官,在机体饥饿的情况下作为细胞的燃料。琥珀酰辅酶A转移酶1(OXCT1)是酮体分解代谢的限速酶,定位在肝外组织的线粒体。据文献报道,在肝癌细胞中,OXCT1在血清饥饿的条件下可以被mTORC2-AKT-SP1通路重新激活,以维持肝癌细胞的生长。并且,已有多篇文献报道,OXCT1在多种肿瘤中呈上调趋势。我们研究发现,OXCT1的蛋白水平在非小细胞肺癌细胞系及组织中均呈高表达。敲低OXCT1的表达可抑制NSCLC细胞的生长和迁移,并诱导细胞发生凋亡。同时我们发现敲低OXCT1的表达使细胞中ATP水平降低,线粒体的数量也有所减少。通过对其中的分子机制的研究,我们发现沉默OXCT1使得磷酸化IKKα/β及磷酸化IκBα蛋白水平降低,IκBα的蛋白水平升高,磷酸化p65的蛋白水平降低,由p65转录的迁移相关基因MMP2和MMP9的表达水平也下降。这表明O...

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 前言
    1.1 研究肺癌的社会和经济意义
    1.2 OXCT1在肺癌中的研究现状与动态分析
    1.3 NF-κB在肺癌中的研究现状与动态分析
第2章 OXCT1在非小细胞肺癌中的表达以及对生长的影响
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 试剂和材料
        2.2.3 试剂的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 蛋白质免疫印迹
        2.3.3 荧光定量PCR
        2.3.4 siRNA(以6孔板为例)
        2.3.5 饱和密度实验(24孔板)
        2.3.6 克隆集落形成实验(6孔板)
        2.3.7 细胞凋亡检测实验
        2.3.8 ATP检测实验
        2.3.9 线粒体染色实验
    2.4 实验结果
        2.4.1 OXCT1在非小细胞肺癌中高表达
        2.4.2 OXCT1促进NSCLC细胞生长
        2.4.3 干扰OXCT1基因促进了NSCLC细胞凋亡
    2.5 讨论
第3章 OXCT1对非小细胞肺癌细胞迁移影响
    3.1 引言
    3.2 材料(部分同前文)
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 试剂和材料
    3.3 实验方法(部分同前文)
        3.3.1 划痕实验
        3.3.2 Transwell实验
        3.3.3 鬼笔环肽染色实验
    3.4 实验结果
        3.4.1 干扰OXCT1基因表达抑制了非小细胞肺癌的迁移
    3.5 讨论
第4章 OXCT1能够激活NF-κB通路及其转录活性
    4.1 前言
    4.2 材料(部分同前文)
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 试剂和材料
    4.3 实验方法(部分同前文)
        4.3.1 质粒构建
        4.3.2 质粒转染(6孔板)
        4.3.3 免疫荧光
        4.3.4 核质分离实验
    4.4 实验结果
        4.4.1 干扰OXCT1的表达对NF-κB通路及其下游信号通路的影响
    4.5 讨论
第5章 主要的结论和展望
    5.1 主要的结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果



本文编号：3838796