BUB1在膀胱移行上皮癌中的表达与意义及BUB1磷酸化激活STAT3的机制研究

发布时间：2023-08-17 18:44

　　目的:研究苯并咪唑出芽抑制解除同源物1(BUB 1)在膀胱癌中的表达情况,并分析BUB 1与膀胱癌患者临床病例资料及膀胱癌复发的相关性。研究BUB1在调节膀胱癌细胞干细胞潜能中的作用,分析其表达水平与干细胞主要转录因子之间的相关性。探讨BUB1磷酸化激活STAT3的机制研究。方法:收集62例膀胱尿路上皮癌组织标本和40例正常膀胱黏膜组织标本应用免疫组化技术测定BUB1表达情况;应用western–blot技术检测四对同一来源的膀胱癌组织和癌旁正常组织BUB1表达情况;应用qRT-PCR技术检测68例膀胱癌患者肿瘤组织及正常膀胱组织BUB 1 mRNA水平表达情况,并根据其结果与临床资料及随访结果,通过Kaplan-Meier生存曲线及COX比例风险回归模型分析其与临床病理分期、分级、膀胱癌复发可能的相关性。以CD 44和CD 24为干细胞标志物,通过流式细胞术筛选膀胱癌细胞系EJ、T24、HTB-9中的肿瘤干细胞;通过qRT-PCR方法比较敲低BUB 1后干细胞主要转录因子的表达水平的改变,通过细胞成球实验比较改变BUB1表达水平后不同CD44表达水平的膀胱癌HTB-9细胞成球数目;建...

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、BUB1在膀胱癌组织中的表达及临床意义
    1.1 对象和方法
        1.1.1 研究对象
        1.1.2 主要实验试剂
        1.1.3 主要试剂配制
        1.1.4 主要仪器
        1.1.5 实验方法
        1.1.6 统计学处理
    1.2 结果
        1.2.1 BUB1在膀胱尿路上皮癌中的表达情况
            1.2.1.1 免疫组化检测BUB1在膀胱癌中的表达
            1.2.1.2 Western blot检测BUB1在膀胱癌中的表达
            1.2.1.3 mRNA水平检测BUB1在膀胱癌中的表达
        1.2.2 BUB1表达情况的临床意义
            1.2.2.1 癌组织中BUB1表达量与临床病理相关性分析
            1.2.2.2 BUB1表达量与膀胱癌复发的相关性分析
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、BUB1调节膀胱癌细胞干细胞潜能
    2.1 对象与方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 主要试剂配制
        2.1.4 主要仪器
        2.1.5 实验方法
    2.2 结果
        2.2.1 流式细胞仪分选肿瘤干细胞结果
        2.2.2 HTB-9转染效果验证
        2.2.3 BUB1表达情况与CD44 的关系
        2.2.4 BUB1表达水平不同影响细胞成球实验结果
        2.2.5 BUB1表达水平与其他干细胞相关基因的关系
        2.2.6 显微镜下观察BUB1影响HTB-9有丝分裂过程
        2.2.7 体内裸鼠成瘤实验结果
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、BUB1磷酸化STAT3的机制研究
    3.1 对象和方法
        3.1.1 研究对象
        3.1.2 主要实验试剂
        3.1.3 主要试剂配制
        3.1.4 主要仪器
        3.1.5 实验方法
    3.2 结果
        3.2.1 BUB1可以物理性结合STAT3
            3.2.1.1 BUB1表达情况与STAT3 具有相关性
            3.2.1.2 BUB1可以结合STAT3 形成蛋白复合物
            3.2.1.3 BUB1结合位点STAT3研究
        3.2.2 BUB1表达水平影响STAT3 磷酸化水平
        3.2.3 BUB1调节SOX2 启动子区活性
        3.2.4 体内实验验证BUB1对STAT3和SOX2 表达水平的影响
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 有丝分裂检查点及BUB1研究进展
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3842369