编码RNA CRIP1在急性髓系白血病中的表达水平及其临床意义研究

发布时间：2023-09-17 16:58

　　目的CRIP1在肿瘤的发生发展中扮演着重要作用,其在实体瘤中的研究越来越多,但是在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中却鲜有报道。本研究的目的是评估CRIP1在AML中的表达水平、临床意义以及可能参与的调控机制。方法采用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测138例AML患者和38例正常对照中CRIP1表达的水平。收集患者临床数据,评估其临床意义。通过甲基化特异性PCR(Methylation‐specific PCR,MSP)和亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测AML中CRIP1基因启动子的甲基化态势。评估CRIP1在AML中的表达水平与其甲基化的相关性。收集公共数据库资料,进一步分析来自癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达综合库(Gene Expression Omnibus,GEO)的五个公开可用的AML数据集,进一步验证我们的结果。通过网络数据库预测可能调控CRIP1在AML中表达水平的micro...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 急性髓系白血病
    1.2 编码RNA
    1.3 CRIP1 基因
第二章 研究目的、设计方案、研究意义
    2.1 研究目的
    2.2 设计方案
    2.3 研究意义
第三章 材料和方法
    3.1 材料
        3.1.1 研究对象
        3.1.2 所需试剂
        3.1.3 所用仪器
        3.1.4 引物
    3.2 研究方法
        3.2.1 BMMNCs提取
        3.2.2 总RNA提取
        3.2.3 DNA提取
        3.2.4 逆转录
        3.2.5 亚硫酸氢盐修饰基因组DNA
        3.2.6 RQ-PCR检测CRIP1、miR-299-5P、miR-3173-5P的表达水平
        3.2.7 RQ-MSP检测CRIP1 甲基化水平
        3.2.8 BSP检测CRIP1 甲基化密度
        3.2.9 纯化回收PCR产物
        3.2.10 构建重组载体
        3.2.11 转化重组质粒
        3.2.12 质粒提取、鉴定及测序
        3.2.13 建立阳性模板
        3.2.14 细胞遗传学检查
        3.2.15 基因突变检测
        3.2.16 公共数据库分析
        3.2.17 统计分析
第四章 实验结果
    4.1 CRIP1在AML中的表达水平及其临床意义
        4.1.1 CRIP1在AML中表达水平上调
        4.1.2 CRIP1 表达水平与AML患者临床参数的相关性
        4.1.3 CRIP1 表达水平与AML患者预后的相关性
        4.1.4 CRIP1 表达水平对AML患者化疗反应的影响
    4.2 CRIP1在AML中的甲基化态势及其与表达水平的相关性
    4.3 microRNA在 AML中的临床意义及其与CRIP1 的相关性
        4.3.1 microRNA筛选
        4.3.2 miR-299-5p和 miR-3173-5p在 AML中的临床意义
        4.3.3 miR-299-5p和 miR-3173-5p在 AML中表达水平及与CRIP1 相关性
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
致谢
硕士期间发表论文、获奖情况及科研成果



本文编号：3847835