干燥对白果中银杏酚酸的影响及银杏酚与顺铂联合应用对肿瘤作用效果的观察
发布时间：2017-05-23 22:14
本文关键词：干燥对白果中银杏酚酸的影响及银杏酚与顺铂联合应用对肿瘤作用效果的观察，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：银杏酸和银杏酚为烷基酚酸类小分子化合物,存在于银杏(Ginkgo biloba L.)的叶、果和外种皮中,其中银杏酸被认为是导致白果过敏的主要物质,因此在白果加工过程中,降低银杏酚酸类化合物含量,以达到食品安全的要求。与此同时,该类化合物又表现出突出的杀菌、杀虫和抗肿瘤活性,在食品药品和植物农药的开发方面有十分巨大的应用潜力。本文首先从白果干燥处理角度出发,研究不同干燥方法对白果中银杏酸、银杏酚含量的影响。其次,研究银杏酸降解产物银杏酚对顺铂治疗荷肝癌小鼠疗效的影响。并初步探索银杏酚抗肿瘤的作用机理。研究的主要结论如下:1、采用微波和红外对白果进行干燥,以60℃烘干为参照,对比不同干燥方法对其中银杏酸、银杏酚含量的影响。结果表明:与60℃烘干相比,白果经700W微波、80℃红外干燥处理后银杏酸、银杏酚含量稍有降低。在白果浆中加一定量Na2CO3静置2~12 h,再于同样条件干燥,发现加碱处理后银杏酸、银杏酚的含量明显降低,其降低率与加碱处理时间无依赖关系;与80℃红外加碱干燥相比,700W微波加碱干燥处理后白果中银杏酸含量降低了39%,银杏酚含量降低了23.3%。2、银杏酚体外对HepG2、SW480细胞迁移、侵袭的作用。采用MTT法,检测银杏酚及其与顺铂联用对HepG2、SW480、HGC三种细胞存活率的影响;采用Transwell小室实验,探讨银杏酚对HepG2、SW480细胞迁移、侵袭的作用;采用Western blot观察MMP-7、Rho A和P-AKT的表达情况。结果表明,在0~80μg/mL时,银杏酚体外对HepG2、SW480、HGC的增殖具有很好的抑制作用。当顺铂与银杏酚按照1:2、1:4、1:8的浓度比例联用时,表现为协同作用,联合指数分别为1.23、1.19、1.16。分别用20、40、80μg/mL银杏酚处理HepG2、SW480细胞24h后,两种细胞的迁移、侵袭能力随着银杏酚浓度的增加而逐渐减弱。不同浓度银杏酚处理HepG2、SW480 24h后观察到,随着银杏酚浓度的增加,MMP-7和Rho A、P-AKT的表达量逐渐降低。3、银杏酚与顺铂联用对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。昆明小鼠接种H22肝癌细胞构造实体瘤模型。分别以7.5 mg/kg顺铂、1/2顺铂(3.75 mg/kg)、40mg/kg银杏酚,及1/2顺铂(3.75 mg/kg)联合银杏酚10 mg/kg(低)或20 mg/kg(中)或40 mg/kg(高)隔天腹腔给药10次,取血后处死。结果表明40 mg/kg银杏酚联合1/2顺铂(3.75 mg/kg)治疗荷H22小鼠的抑瘤效果与7.5 mg/kg顺铂组接近且明显优于3.75 mg/kg顺铂组,降低顺铂的毒性,避免了小鼠体重减轻。计算Q值=1.461.15,说明40 mg/kg银杏酚能提高3.75 mg/kg顺铂的抑瘤能力;与3.75 mg/kg顺铂组相比,1/2顺铂(3.75 mg/kg)与40 mg/kg银杏酚的联用,提高了小鼠的胸腺、脾脏指数,40 mg/kg银杏酚对顺铂具有减毒增效的作用。4、银杏酚对顺铂化疗Heps肝癌小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平的影响。昆明小鼠接种Heps肿瘤细胞构造移植瘤模型。分别以顺铂(3.75 mg/kg)、银杏酚组(40 mg/kg)、顺铂(3.75 mg/kg)+20 mg/kg低剂量银杏酚、顺铂(3.75mg/kg)+40 mg/kg高剂量银杏酚,隔天腹腔给药10次,取血后处死。结果显示40 mg/kg银杏酚与顺铂联用不仅能提高小鼠的胸腺指数、脾脏指数和肝脏指数,还能显著升高血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α的水平,Q值=1.16㧐1.15,说明40 mg/kg银杏酚能提高3.75 mg/kg顺铂的抑瘤能力。40 mg/kg银杏酚对顺铂具有增效作用,可能通过拮抗顺铂对化疗小鼠免疫功能的抑制作用,增强其抗肿瘤能力。
【关键词】：银杏酚 肝癌细胞株 动物模型 增效减毒 免疫调节
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R73-36
【目录】：
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-13
- 第一章 绪论13-19
- 1.1 引言13-14
- 1.2 白果的红外和微波干燥14-15
- 1.2.1 红外、微波干燥的特点14
- 1.2.2 银杏酸的脱羧降解14-15
- 1.3 银杏酚的生物活性15-16
- （1）杀虫作用15
- （2）致过敏作用15
- （3）抗肿瘤作用15-16
- 1.4 中药及其活性成分与顺铂联用在治疗肿瘤中的协同作用16-17
- 1.5 本研究的意义及主要研究内容17-19
- 1.5.1 本研究的意义17
- 1.5.2 本文的主要研究内容17-19
- 第二章 微波、红外干燥对白果中银杏酚酸含量的影响19-27
- 2.1 前言19
- 2.2 实验材料19
- 2.2.1 主要试剂19
- 2.2.2 主要实验仪器设备19
- 2.3 实验方法19-21
- 2.3.1 白果浆样品的干燥19-20
- 2.3.2 含水量测定20
- 2.3.3 薄层干燥的动力学模型20-21
- 2.3.4 干燥样品中银杏酸和银杏酚含量的检测21
- 2.4 结果与分析21-25
- 2.4.1 不同干燥方法对白果粉品质的影响21-22
- 2.4.2 白果浆微波、红外干燥的失水特性22-23
- 2.4.3 动力学模型23-24
- 2.4.4 不同干燥处理对白果中银杏酚酸含量的影响24-25
- 2.5 讨论25-26
- 2.6 本章小结26-27
- 第三章 银杏酚体外对HepG2细胞迁移、侵袭的影响27-40
- 3.1 前言27
- 3.2 实验材料27-28
- 3.2.1 细胞株27
- 3.2.2 实验材料和试剂27
- 3.2.3 主要实验仪器设备27-28
- 3.2.4 主要试剂的配制28
- 3.3 实验方法28-30
- 3.3.1 银杏酚及其与顺铂联用对肿瘤细胞生长的抑制作用28-29
- 3.3.2 银杏酚对HepG2、SW480细胞迁移能力的影响29-30
- 3.3.4 银杏酚对HepG2、SW480细胞侵袭能力的影响30
- 3.3.5 Western blot检测与迁移、侵袭相关蛋白的变化30
- 3.3.6 统计学分析30
- 3.4 结果与分析30-38
- 3.4.1 银杏酚对HepG2、SW480、HGC细胞生长的抑制作用30-31
- 3.4.2 银杏酚与顺铂联用对HepG2细胞生长的影响31-32
- 3.4.3 银杏酚对HepG2、SW480细胞迁移、侵袭能力的影响32-37
- 3.4.4 银杏酚对MMP-7、Rho A和P-AKT蛋白表达的影响37-38
- 3.5 讨论38
- 3.6 本章小结38-40
- 第四章 银杏酚对顺铂化疗H22荷瘤小鼠疗效的影响40-47
- 4.1 前言40
- 4.2 实验材料40-41
- 4.2.1 试剂、材料40
- 4.2.2 细胞株40
- 4.2.3 实验动物40
- 4.2.4 主要实验仪器设备40-41
- 4.3 实验方法41-42
- 4.3.1 细胞株的培养41
- 4.3.2 移植瘤模型的建立41
- 4.3.3 银杏酚与顺铂联用对H22荷瘤小鼠的分组情况、给药途径41-42
- 4.4 统计学分析42
- 4.5 结果与分析42-45
- 4.5.1 银杏酚与顺铂联用对荷H22小鼠生存状态的影响42
- 4.5.2 银杏酚与顺铂联用对荷H22小鼠体质量、瘤重、抑瘤率影响及Q值计算42-43
- 4.5.3 银杏酚与顺铂联用对 H22 荷瘤鼠存活时间的影响43-44
- 4.5.4 银杏酚与顺铂联用对H22荷瘤鼠免疫器官的影响44
- 4.5.5 银杏酚与顺铂联用对H22荷瘤鼠肿瘤组织形态的影响44-45
- 4.6 讨论45-46
- 4.7 本章小结46-47
- 第五章 银杏酚对顺铂化疗Heps肝癌小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平的影响47-55
- 5.1 前言47
- 5.2 实验材料47-48
- 5.2.1 试剂、材料47
- 5.2.2 细胞株47
- 5.2.3 实验动物47
- 5.2.4 主要实验仪器设备47-48
- 5.3 实验方法48-49
- 5.3.1 细胞株的培养48
- 5.3.2 移植瘤模型的建立48
- 5.3.3 银杏酚与顺铂联用对Heps荷瘤小鼠的分组情况、给药途径48-49
- 5.4 统计学分析49
- 5.5 结果与分析49-53
- 5.5.1 银杏酚与顺铂联用对Heps荷瘤鼠体质量、瘤重、抑瘤率影响及Q值计算49-50
- 5.5.2 银杏酚与顺铂联用对Heps荷瘤鼠生存个数的影响50
- 5.5.3 银杏酚与顺铂联用对Heps荷瘤鼠免疫器官的影响50-51
- 5.5.4 银杏酚与顺铂联用对荷Heps小鼠肿瘤生长大小的影响51-52
- 5.5.5 银杏酚与顺铂联用对荷Heps小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α的作用52-53
- 5.6 讨论53-54
- 5.7 本章小结54-55
- 第六章 结论与展望55-58
- 6.1 本论文的主要结论55-57
- 6.2 研究展望57-58
- 参考文献58-64
- 致谢64-65
- 攻读硕士学位期间发表的论文65
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 田亚平;尤文元;李_g娜;;荧光分析法测定银杏酚酸[J];分析化学;2006年S1期
2 田晓清;王锡昌;吴文惠;陈志华;骆佼君;包斌;;高压液相色谱分析法测定大佛指银杏酚酸含量[J];营养学报;2010年06期
3 倪学文;吴谋成;;银杏外种皮中银杏酚酸抗肿瘤活性的研究[J];华中农业大学学报;2006年04期
4 朱斌;刘芬;严兆华;;银杏叶提取物中脱除银杏酚酸的工艺研究[J];北方药学;2014年04期
5 严宏凤;;RP-HPLC测定银杏酚酸的方法研究[J];淮阴工学院学报;2008年05期
6 倪力军,张立国;GBE中银杏酚酸的分离技术及其检测[J];中国中医药信息杂志;2000年06期
7 戴丽娜;苏勤;周陈晨;王辉;陈娇;张平;;银杏酚酸提高Tca8113对化学治疗药物敏感性的研究[J];国际口腔医学杂志;2011年03期
8 ;[J];;年期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 倪学文;银杏酚酸的分离纯化及其生物活性研究[D];华中农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 刘盼君;银杏酚单体的分离鉴定及分析方法建立[D];江苏大学;2016年
2 刘亚丽;干燥对白果中银杏酚酸的影响及银杏酚与顺铂联合应用对肿瘤作用效果的观察[D];江苏大学;2016年
3 赵云奎;银杏酚酸单体分离及其生物活性研究[D];西北农林科技大学;2007年
4 辛云海;银杏叶化学成分及银杏酚酸脱除工艺的研究[D];广西师范大学;2007年
本文关键词：干燥对白果中银杏酚酸的影响及银杏酚与顺铂联合应用对肿瘤作用效果的观察，由笔耕文化传播整理发布。
，本文编号：389235
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/389235.html
最近更新
教材专著
