外泌体激活的肝脏星形细胞通过IL-6/STAT3通路调节乏氧肿瘤细胞的乳酸代谢促进化疗耐药的机制研究

发布时间：2024-03-21 20:50

　　目的:结直肠癌是人类最主要的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率呈上升趋势。肝脏是结直肠癌出现远处转移最常见的靶器官,结直肠癌肝转移也是影响患者预后最主要的因素。对于术后复发转移和不可切除的结直肠癌肝转移患者,以化疗为主的综合治疗是最常见的治疗手段。随着肿瘤分子靶向研究的不断深入,靶向药物与化疗药物联合治疗的疗效越来越好,但化疗耐药仍然是影响肿瘤复发和转移最关键的因素。肿瘤微环境在化疗耐药方面发挥重要的作用,既往研究发现肿瘤细胞和基质细胞在不同营养条件下发生的代谢途径改变赋予肿瘤细胞更强的增殖和耐药能力。外泌体作为传递信息物质的载体介导肿瘤细胞和基质细胞之间的串话。近年来,研究发现外泌体调节的肿瘤细胞和肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)间的代谢重编程在肿瘤细胞的侵袭、转移和耐药方面扮演重要角色。肿瘤细胞的快速增殖导致肿瘤内部乏氧,本研究的目的是探讨在肝转移微环境中,常氧结直肠肿瘤细胞外泌体通过驯化肝脏星形细胞调节乏氧肿瘤细胞的代谢从而促进化疗耐药的机制,研究结果可能为结直肠癌肝转移化疗耐药患者提供新的预测标志物和潜在治疗靶点。研究方法:...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略语
第一部分 :结直肠肿瘤细胞外泌体活化肝脏星形细胞并促进其分泌IL-6和增强糖酵解能力的机制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 CCK-8检测细胞活性
            2.2.3 细胞凋亡检测
            2.2.4 细胞蛋白提取
            2.2.5 BCA测定蛋白浓度
            2.2.6 Western Blot蛋白印迹杂交
            2.2.7 外泌体分离
            2.2.8 外泌体摄取实验
            2.2.9 免疫荧光
            2.2.10 葡萄糖摄取实验
            2.2.11 乳酸生成实验
            2.2.12 酶联免疫吸附实验
            2.2.13 统计学分析
    3 结果
        3.1 结直肠肿瘤细胞外泌体的鉴定
        3.2 结直肠肿瘤细胞外泌体能够将HSCS活化成为MFS
        3.3 结直肠肿瘤细胞外泌体能够促进HSCS增殖和耐药
        3.4 结直肠肿瘤细胞外泌体能够促进HSCS分泌IL-6
        3.5 结直肠肿瘤细胞外泌体增强HSCS糖酵解能力
        3.6 肿瘤细胞外泌体通过传递P-ERK和 P-AKT促进MFS分泌IL-6 和增强糖酵解
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :结直肠肿瘤细胞外泌体活化的肝脏星形细胞培养上清促进乏氧肿瘤细胞耐药的机制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 CCK-8检测细胞活性
            2.2.3 细胞凋亡检测
            2.2.4 细胞蛋白提取
            2.2.5 BCA测定蛋白浓度
            2.2.6 Western Blot蛋白印迹杂交
            2.2.7 外泌体分离
            2.2.8 ATP生成实验
            2.2.9 基因敲除实验
            2.2.10 免疫组化
            2.2.11 酶联免疫吸附实验
            2.2.12 统计学分析
    3 结果
        3.1 MFs的培养上清能够促进乏氧肿瘤细胞SN38耐药
        3.2 MFS的培养上清通过分泌IL-6 促进乏氧肿瘤SN38 耐药
        3.3 MFS培养上清中的IL-6 通过调节乏氧肿瘤细胞乳酸代谢促进SN38 耐药
        3.4 MFS培养上清通过激活IL-6/STAT3 通路调节乏氧肿瘤细胞乳酸代谢
        3.5 结直肠癌肝转移患者血浆IL-6水平与伊立替康耐药和肿瘤预后明显相关
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3934125