肿瘤微环境中肝星状细胞促进结直肠癌肝转移的机制研究

发布时间：2024-05-13 23:55

　　目的:结直肠癌肝转移与肿瘤微环境关系密切,相互影响。转移至肝脏的肠癌细胞需要建立起适合自身生长的微环境才能生存,同时肝脏微环境中的多种细胞和非细胞成分也促进肿瘤生长。肝星状细胞(HSC)是肝脏基质中主要组成细胞之一,活化后的HSC可以分泌多种物质,包括丰富的细胞外基质成分,肝细胞生长因子、软骨寡聚基质蛋白等,从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移。然而,HSC如何促进肠癌细胞肝转移的机制尚不十分清楚。因此本研究在建立肠癌肝转移模型基础上,探讨肝脏微环境中HSC与肠癌细胞肝转移之间的关系。研究方法:1、选取Caco2、RKO细胞采用脾脏注射(保脾法)法建立肠癌肝转移模型,并分离出两株肠癌肝转移细胞系Caco2-H,RKO-H;2、肿瘤细胞的COL6A3基因mRNA的表达水平应用RT-qPCR技术;3、脂质体介导siRNA转染,沉默COL6A3基因表达;4、细胞短期增殖能力(0、24、48、72小时)利用MTT检测细胞活力方法测定;5、细胞迁移能力应用Transwell法检测;6、肠癌细胞长期增殖能力利用集落形成实验检测;7、细胞与细胞外基质粘附能力应用细胞-细胞外基质粘附实验检测;8、细胞蛋白表达...

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【部分图文】：

图3.3Caco2-H、RKO-H发生上皮间质转化（EMT）

中国医科大学博士学位论文8 A：种入400个细胞/孔，培养14天后收集集落，Caco2-H、RKO-H增殖能力明显增加；B：3x104个Caco2、Caco2-H、RKO、RKO-H加入铺好预制胶的孔板中，45分钟后收集粘附细胞数目，显示出Caco2-H、RKO-H粘附能力明显增....

图13.2COL6A3在Caco2-H、RKO-H细胞的裸鼠肝脏成瘤中高表达02COL6RKO-HN=3RKON=3

中国医科大学博士学位论文25 A：（左侧）两个火山图显示Caco2-H与Caco2相比，RKO-H与RKO相比的差异mRNA表达，（右侧）柱状图显示两组细胞差异mRNA改变数目；B（左侧）韦恩图显示两组测序结果分别下调/上调mRNA取交集，（右侧）图表显示COL6A3差异显著；C....

图18.1肠癌肝转移患者血浆中COL6A3蛋白表达升高1520re1520re20p<0.05B05101520NumberofCOL6Ascorepositiv

浞治狢OL6A3高表达和COL6A3低表达数据，用limma包进行差异分析；将样本依据IGSF10表达高低进行分组后，利用coxph函数在各个临床亚分类中进行HR和p.value的计算；对COL6A3高低表达分组进行生存曲线的绘制，对COL6A3高低表达分组、分期、年龄、性别进行....

图18.2免疫组化显示COL6A3在肝转移灶表达高于原发灶IHCScore:2IHCScore:0IHCScore:8IHCScore:0400x

中国医科大学博士学位论文37 A：ELISA检测肝转移患者外周血COL6A3表达明显高于无肝转移患者，p<0.05。B:无远处转移肠癌患者和肝转移患者ROC曲线分析，曲线下AUC面积0.6654。18.2患者免疫组化结果显示COL6A3在肝转移灶表达高于原发灶30对病例纳入标准：....

本文编号：3972895