硒酸壳聚糖诱导人乳腺癌细胞凋亡及其机理的体外研究

发布时间：2024-05-25 13:56

　　本文以人乳腺癌MCF-7和BT-20细胞为研究对象,通过与硒酸壳聚糖共培养一定时间后,研究硒酸壳聚糖对人乳腺癌细胞凋亡的影响及可能存在的凋亡机理。本文所用药物硒酸壳聚糖(4827.0 Da)兼备硒与多糖的共同抗癌作用,且已经通过红外确定硒与多糖连接位点。首先,验证硒酸壳聚糖诱导人乳腺癌细胞凋亡的发生。MTT实验结果表明,硒酸壳聚糖能抑制细胞的增殖,且当作用浓度达到100 μg/mL是MCF-7细胞的最佳作用剂量,200 μg/mL时与硒酸壳聚糖共培养时间为24 h其作用效果显著,细胞增殖抑制率可达到70%以上且存在较强的时间剂量依赖关系。但对正常人乳腺细胞Hs 578Bst基本无毒性作用;形态学变化观察到相应浓度的硒酸壳聚糖能诱导乳腺癌细胞形态凋亡;AnnexinV-FITC/PI双染实验中,硒酸壳聚糖与乳腺癌细胞作用指定时间段后,经流式细胞术检测证明硒酸壳聚糖可诱导乳腺癌细胞凋亡且是时间依赖关系;此外,细胞周期的检测结果表明硒酸壳聚糖破坏了乳腺癌细胞分裂周期的连续性,并将MCF-7细胞阻滞在G2/M、S期;BT-20细胞阻滞在S期。其次,探究了乳腺癌细胞在硒酸壳聚糖诱导下的凋亡信号途...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－１硒酸壳聚糖结构以及不同浓度不同培养８?－２４?ｈ的硒酸壳聚糖对ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０细胞、人??

因此我们可以得出结论，在ＭＴＴ实验中，是硒酸壳聚糖的生物活性大力诱导了这两??种人乳腺癌细胞的活性。并且，基于本次实验对象的特殊性，我们以正常人乳腺Ｈｓ??５７８Ｂｓｔ细胞，进行ＭＴＴ实验。结果如（图３－１－Ｃ）所示，即使硒酸壳聚糖浓度增加到??６００?ｐｇ／ｍＬ

图３－２倒置显微镜下观察指定浓度硒酸壳聚糖与ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０细胞共培养８?－?２４?ｈ后其形态变??化（ｘ２０）??

Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｉｉｏｎ?ｏｆ?ＳＳＣＣ?（ｎｇ／ｍｌ）??（Ｃ）??图３－１硒酸壳聚糖结构以及不同浓度不同培养８?－２４?ｈ的硒酸壳聚糖对ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０细胞、人??正常乳腺Ｈｓ?５７８Ｂｓｔ细胞生长的影响（Ｐ＜０．０５?）??Ａ：ＭＣＦ－７?细胞，Ｂ：ＢＴ－２０?细胞....

图３－３扫描电镜观察指定浓度砸酸壳聚糖与ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０细胞共培养后其形态变化??注：Ａ：ＭＣＦ－７?细胞；Ｂ：ＢＴ－２０?细胞??

Ａ：?ＭＣＦ－７?ｃｅｌｌｓ；?Ｂ：?ＢＴ－２０?ｃｅｌｌｓ??３．２．３?Ｈｏｅｃｈｓｔ?３３３４２／Ｗ双染观察细胞凋亡形态变化??如图３－４，由于细胞结构完整，未经药物处理的两种乳腺癌细胞对两种染料均有??拒染性，因此只有少量细胞被Ｈｏｅｃｈｓｔ?３３３４２染成淡蓝色。而经２....

图３－４?ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０细胞与硒酸壳聚糖作用８?２４?ｈ的Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２／ＰＩ双染结果（ｘ２０）??注：Ａ：?ＭＣＦ－７细胞Ｂ：?ＢＴ－２０细胞??Ｆｉｇ．?３－４?Ａ?ａｎｄ?Ｂ?ｓｔａｎｄ?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２／ＰＩ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＭＣＦ－７?ａｎｄ?ＢＴ－２０?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ??ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ＳＳＣＣ?８?－?２４?ｈ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．?（ｘ２０）??

３．３硒酸壳聚糖诱导人乳腺癌细胞凋亡率的研究??在Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染实验中，我们可以明显看出经过指定硒酸壳聚糖诱导??的人乳腺癌细胞凋亡。在图３－５所示，流式细胞仪的两个炎光通逍ＦＬＨ－１和ＦＬＨ－３??分别用来收集Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ和ＰＩ的荧光信号....

本文编号：3982198