非小细胞肺癌诊断新标志物：外泌体microRNA-744-5p

发布时间：2024-07-05 02:14

　　研究背景与目的肺癌是最常见的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占原发性肺癌的85%左右。早期非小细胞肺癌的预后较好,但在临床工作中大多数就诊的患者已处于疾病的晚期。目前临床上尚无能够有效检测非小细胞肺癌的生物标志物。外泌体(exosomes)是细胞释放的,直径在40-150nm的细胞外囊泡,其内包裹的核酸和蛋白质能够反应细胞的内在变化,并且在疾病的发生进展中起着重要作用。本研究尝试鉴别在非小细胞肺癌尤其是早期非小细胞肺癌与健康人群差异表达的exosomal微小RNA(microRNA),筛选出可作为诊断早期非小细胞肺癌的生物标志物。方法首先分析课题组前期血清及细胞上清exosomes测序结果,筛选出在肺癌exosomes中显著差异表达的microRNA。进一步使用Exoquick外泌体分离试剂盒提取血清中的exosomes,通过实时荧光定量PCR分析非小细胞肺癌与健康对照组血清exosomes中microRNA的表达差异,通过计算受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价候选生物标志物的诊断效能。通过实时荧光定量PCR观察潜在microRNA在肺癌组织以及肺癌细胞中的表达水平。采用细...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Exosomal microRNA-744-5p是NSCLC的生物标志物
    1 引言
    2 实验材料与试剂
        2.1 主要试剂
        2.2 主要耗材
        2.3 主要仪器
    3 实验方法
        3.1 入组标准
        3.2 血清样品收集以及预处理
        3.3 血清exosomes分离
        3.4 Exosomes RNA提取
        3.5 qPCR定量检测microRNA
        3.6 统计分析
    4. 实验结果
        4.1 临床标本基本信息
        4.2 差异表达exosomal microRNA的初步验证
        4.3 Exosomal microRNA-744-5p的诊断效能评价
        4.4 Exosomal microRNA-744-5p是诊断早期非小细胞肺癌的生物标志物
    5 讨论
第二部分 microRNA-744-5p在肺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用
    1 引言
    2 实验材料和试剂
        2.1 实验所用细胞株
        2.2 主要试剂
        2.3 主要耗材
        2.4 主要仪器
    3 实验方法
        3.1 肺癌组织标本收集
        3.2 非小细胞肺癌细胞的复苏、传代和冻存
        3.3 肿瘤组织和细胞系中总RNA提取
        3.4 qRCR定量检测microRNA
        3.5 细胞功能学实验
        3.6 统计分析
    4 实验结果
        4.1 microRNA-744-5p在非小细胞肺癌组织中高表达
        4.2 microRNA-744-5p在非小细胞肺癌细胞中高表达
        4.3 microRNA-744-5p促进非小细胞肺癌的增殖能力
        4.4 microRNA-744-5p促进非小细胞肺癌的迁移和侵袭能力
    5 讨论
全文总结
    一、主要结果与创新之处
    二、后续工作计划
参考文献
英文缩略词表
个人简介及成果
致谢



本文编号：4000881