Surfactin对舌鳞癌Tca8113细胞株增殖、凋亡和迁移影响的研究

发布时间：2024-12-03 20:43

　　目的:初步探讨枯芽孢杆菌发酵产物Surfactin对体外培养的舌鳞癌Tca8113细胞株发生和发展影响。方法:观察细胞的生长状态,当细胞铺满瓶壁约85%-90%时,分别加入20μg/m L、40μg/m L、60μg/m L、80μg/m L、100μg/m L浓度的药物,培养箱内培养24h、48h,SRB染色法检测Surfactin对舌鳞癌生长的影响;克隆形成实验,通过计数分析Surfactin对舌鳞癌细胞克隆数目的影响;Hochest/PI双染法观察Surfactin作用于肿瘤细胞后细胞的形态的变化;流式细胞术检测早期凋亡;Wound healing和Transwell迁移实验分别观察Surfactin作用下对舌鳞癌细胞划伤伤口的愈合能力和对细胞迁移的影响;免疫印迹法检测与细胞迁移有关的蛋白MMPs表达的含量。结果:1.由SRB实验结果知,Surfactin能够有效抑制舌鳞癌细胞的生长,Surfactin对肿瘤细胞的抑制率随着药物剂量的加大也增大,24h、48h的IC50分别为74μg/m L和53μg/m L。2.克隆形成实验结果显示Surfactin能够抑制舌鳞癌细胞的克隆形成,...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 舌癌的治疗现状
    1.2 Surfactin作用的实验研究及临床观察
        1.2.1 抗菌作用
        1.2.2 抗炎活性
        1.2.3 抗肿瘤作用
        1.2.4 抗支原体的作用
        1.2.5 抗病毒作用
        1.2.6 抗粘附作用
        1.2.7 Surfactin抗血栓功能
        1.2.8 其它方面的应用
    1.3 本实验课题的研究目的和意义
    1.4 本实验课题的研究内容
    1.5 技术路线
第二章 实验材料和实验方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验所需细胞
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 实验用主要试剂
        2.1.4 药品来源
        2.1.5 主要试验用试剂的配置
第三章 Surfactin能够削弱舌鳞癌细胞株生长的能力
    3.1 实验方法
        3.1.1 细胞复苏
        3.1.2 细胞的生长和传代
        3.1.3 细胞的冻存
        3.1.4 Surfactin作用于舌鳞癌细胞后肿瘤细胞的形态学变化
        3.1.5 SRB（磺酰罗丹明B）染色法检测Surfactin对舌鳞癌Tca8113细胞增殖抑制作用的影响
        3.1.6 平板克隆形成实验
    3.2 实验统计方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 药物干预舌癌细胞后镜下细胞的变化
        3.3.2 Surfactin抗增殖作用
        3.3.3 平板克隆实验结果
    3.4 讨论
    3.5 实验小结
第四章 Surfactin的促凋亡的作用
    4.1 实验方法
        4.1.1 流式细胞仪术检测Surfactin对舌鳞癌细胞凋亡的影响
        4.1.2 Hochest33258/PI双染观察药物处理细后细胞核的变化
    4.2 实验结果
        4.2.1 Hochest/PI染色后细胞形态学观察
        4.2.2 Surfactin对舌癌细胞凋亡的影响
    4.3 讨论
    4.4 实验小结
第五章 Surfactin的抗迁移的作用
    5.1 实验方法
        5.1.1 划伤愈合实验法测定药物干预舌鳞癌细胞后对舌鳞癌细胞迁移的影响
        5.1.2 Transwell小室迁移实验
        5.1.3 免疫印迹法验证Surfactin对MMPs的表达情况
    5.2 实验结果
        5.2.1 Surfactin作用于舌鳞癌细胞后对肿瘤细胞迁移作用的影响
        5.2.2 Transwell小室迁移的实验结果
        5.2.3 蛋白质印记验证Surfactin处理细胞MMPs表达情况
    5.3 实验讨论
    5.4 实验小结
第六章 全文总结
参考文献
中英文略缩词
在校期间完成的科研成果
致谢



本文编号：4014113