AGE/RAGE参与结直肠癌细胞上皮-间质转化及肿瘤干性的调控

发布时间：2025-01-08 22:53

　　 目的:探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对结直肠癌HCT116细胞上皮-间质转化及肿瘤细胞干性的影响,及其可能的作用机制。方法:200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs联合50μmol/L磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)特异性抑制剂LY294002处理HCT116细胞后,分别应用CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell小室法、克隆形成实验和肿瘤细胞成球实验检测HCT116细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成和细胞成球能力。200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs联合50μmol/L LY294002处理HCT116细胞球后,应用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,FCM法检测CD133+细胞球所占比例,蛋白质印迹法检测HCT116细胞球中CD133、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。不同浓度AGEs、200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs联合...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料
    1.2 细胞及细胞培养
    1.3 CCK-8法检测AGEs对HCT116细胞增殖的影响
    1.4 划痕愈合实验检测AGEs对HCT116细胞迁移能力的影响
    1.5 Transwell小室法检测AGEs对HCT116细胞侵袭能力的影响
    1.6 克隆形成实验检测AGEs对HCT116细胞克隆形成能力的影响
    1.7 肿瘤细胞球形成实验检测AGEs对HCT116细胞成球能力的影响
    1.8 Transwell小室法检测AGEs对HCT116细胞球侵袭能力的影响
    1.9 FCM法检测AGEs对HCT116细胞球表面CD133表达的影响
    1.1 0 蛋白质印迹法检测AGEs对HCT116细胞球CD133、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响
    1.1 1 蛋白质印迹法检测AGEs对HCT116细胞RAGE、PI3K信号通路分子和EMT标志蛋白表达的影响
    1.1 2 统计学方法
2 结果
    2.1 AGEs促进HCT116细胞增殖、迁移及侵袭
    2.2 AGEs促进HCT116细胞的克隆形成和细胞成球
    2.3 AGEs促进HCT116细胞球的侵袭
    2.4 AGEs上调CD133+HCT116细胞球比例
    2.5 A G E s上调H C T 1 1 6细胞球C D 1 3 3、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平
    2.6 AGEs上调HCT116细胞中RAGE、p-PI3K、p-Akt、N-cadherin和vimentin蛋白的表达水平
3 讨论



本文编号：4024742