miR-375靶向ATG14调控自噬影响肝癌细胞对索拉菲尼敏感性的机制研究

发布时间：2025-01-14 04:49

　　目的:肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是一种常见的消化系统恶性肿瘤。多数肝癌患者在确诊时已达疾病晚期,失去最佳手术切除时机。索拉菲尼是一种多靶点激酶抑制剂,是目前国内外使用较多的晚期HCC靶向药之一。许多因素会导致肝癌耐药,其中一个重要因素就是自噬的激活。自噬不仅可以通过抑制肿瘤的能量代谢、增殖和转移,抑制肿瘤的进程。同时也有助于维持肿瘤细胞产物合成及代谢的平衡,是缺乏营养的肿瘤细胞获取能量的主要代谢机制。其中自噬相关基因(Autophagy-related genes,ATGs)发挥了重要的调控作用。微RNA(microRNA,miRNA)可通过与mRNA的3’UTRs(Untranslated Regions)端近乎完全互补性的结合,从而在基因表达中起着至关重要的调控作用。本研究针对miR-375靶向结合ATG14影响肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性的机制展开了一系列研究,逐步揭示miR-375调控自噬从而影响肝癌细胞对索拉菲尼敏感性的分子机制,为肝癌治疗以及对治疗药物再敏感提供理论依据。研究方法:1.利用GEO数据库、KEGG基因富集分析等生物信息学方...

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【部分图文】：

图1.KEGG分析富集结果显示GSE109211肝癌组

中国医科大学硕士学位论文173结果3.1KEGG富集分析肝癌组织中索拉菲尼与自噬的相关性为了验证肝癌组织样本中索拉菲尼与自噬的相关性，我们从GEO数据库中获取GSE109211数据：索拉菲尼处理67例患者样本，安慰剂处理73例患者样本。我们归纳总结了10个目前被认为参与细胞内部活....

图2.索拉菲尼药物处理后自噬表达增多A.westernbolt显示索拉菲尼处理Huh7细胞系之后LC3-II/LC3-I比率提高，蛋白p62表达降低（P＜0.05）

中国医科大学硕士学位论文18现其自噬小体增多（图2C）。这三种实验结果提示，索拉菲尼能够诱导肝癌细胞自噬的发生。图2.索拉菲尼药物处理后自噬表达增多A.westernbolt显示索拉菲尼处理Huh7细胞系之后LC3-II/LC3-I比率提高，蛋白p62表达降低（P＜0.05）。B....

图3.抑制自噬肝癌细胞的增殖凋亡表现A.采用MTT法测定加入Baf-A1和si-ULK后索拉菲尼处理Huh7细胞的相对存活率

中国医科大学硕士学位论文19实验结果显示，使用Baf-A1加索拉菲尼处理组中的Q2+Q4区域红色光点分布增多，说明凋亡增多（图3C）。我们发现经自噬抑制剂和小干扰RNA处理后，增殖明显减少，凋亡明显变多。这些结果都说明，阻断自噬之后，索拉菲尼对HCC的生长抑制作用更明显。图3.抑....

图4.miR-375抑制索拉菲尼诱导的自噬A.R语言显示了miRNA的表达热图

中国医科大学硕士学位论文21图4.miR-375抑制索拉菲尼诱导的自噬A.R语言显示了miRNA的表达热图。B.RT-PCR用于评估索拉菲尼处理Huh7细胞中相关的miRNA水平。C.KEGG富集分析结果显示miR-375在肝细胞癌中低表达且与自噬呈相关性。D.对照组、索拉菲尼处....

本文编号：4026432