miR-217通过靶向14-3-3γ抑制胃癌转移的作用及机制研究

发布时间：2017-05-30 12:00

  本文关键词：miR-217通过靶向14-3-3γ抑制胃癌转移的作用及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨miRNA-217(miR-217)抑制胃癌细胞转移的作用及其机制。了解miR-217在胃癌细胞和组织中的表达水平,和对胃癌细胞迁移、增殖及侵袭力的影响。方法:qRT-PCR法比较胃癌组织、癌旁组织、人胃癌细胞系(AGS、MKN28、SGC7901、BGC823、MKN45)和正常胃粘膜上皮细胞系(GES)中miR-217的表达差异。转染miR-217 mimics或Inhibitors后,通过Transwell侵袭实验观察mi R-217的胃癌细胞转移能力的影响;应用Millipore Transwell小室法检测胃癌细胞的侵袭及迁移能力,建立裸鼠尾静脉转移模型,观察稳定表达miR-217在体内对胃癌转移能力的影响;生物信息学分析miR-217的候选靶基因为14-3-3γ,荧光素酶报告基因实验检测SGC7901细胞中miR-217过表达对野生型和突变型14-3-3γ荧光素酶活性的影响。Western blot检测miR-217对14-3-3γ野生型和突变体蛋白表达的影响。统计学分析应用t检验。结果:1.qRT-PCR检测miR-217在20对胃癌及癌旁组织中的表达:miR-217在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.05);qRT-PCR检测miR-217在胃癌细胞系和正常胃癌上皮细胞中的表达:在各胃癌细胞中的表达量相对于正常胃上皮细胞GES显著降低(P0.05)。mi R-217mimics显著抑制SGC7901细胞的侵袭能力,与阴性对照的差异有统计学意义(P0.01)。而mi R-217 inhibitors显著促进SGC7901细胞的侵袭能力(P0.01);体内实验发现稳定过表达miR-217的SGC7901细胞转移能力明显降低。荧光素酶报告基因结果证实miR-217能够抑制14-3-3γ的3’-UTR区荧光素酶活性;Western blot结果显示转染miR-217后,SGC7901细胞中的14-3-3γ蛋白水平明显低于对照组;Western blotting结果显示miR-217过表达显著抑制14-3-3γ-wt,而不能抑制14-3-3γ-mut的蛋白表达。结论:在胃细胞和组织中,mi R-217是一个抑制性mi RNA,表达水平下调影响胃癌的发生及发展,将可能成为胃癌生物靶向治疗的新靶点。miR-217能够通过靶向14-3-3γ抑制胃癌转移,促进mi R-217的表达或抑制14-3-3γ的表达可能是抑制胃癌转移的有效手段。
【关键词】：胃癌 转移 微小RNA 微小RNA-217 14-3-3γ
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-10
• 材料与方法10-20
• 结果20-26
• 讨论26-33
• 结论33-34
• 参考文献34-37
• 英文缩略词对照表37-38
• 致谢38-39
• miRNA-217在恶性肿瘤中的研究进展(综述）39-46
• 参考文献44-46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘中娟;张瑞丽;刘娟娟;高学慧;秦绪珍;郭子建;;多种血清肿瘤标志物联合检测对胃癌辅助诊断的研究[J];标记免疫分析与临床;2016年01期

2 卢燕华;唐三元;;miR-217靶向MAPK1抑制胃癌细胞侵袭转移作用研究[J];中国现代医药杂志;2014年11期

  本文关键词：miR-217通过靶向14-3-3γ抑制胃癌转移的作用及机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：407036