TLR4对口腔鳞癌细胞增殖及细胞因子分泌的影响

发布时间：2017-06-07 02:13

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【摘要】：目的检测Toll样受体(TLRs)在人口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)Tca8113细胞株中的表达情况,研究TLR4对人口腔鳞癌Tca8113细胞株增殖和细胞因子分泌的影响,并探讨其作用机制,为口腔鳞癌的免疫治疗提供实验依据。方法1、分别利用荧光定量PCR和流式细胞术检测口腔鳞癌Tca8113细胞中TLRs m RNA和蛋白的表达情况;2、10μg/ml LPS刺激口腔鳞癌Tca8113细胞,分别在30 min、2 h、16 h,用荧光定量PCR和流式细胞术检测TLR4 m RNA和蛋白的表达变化;3、不同浓度的LPS刺激口腔鳞癌Tca8113细胞24 h、48 h、72 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测LPS对口腔鳞癌Tca8113细胞增殖能力的影响;4、10μg/ml LPS刺激口腔鳞癌Tca8113细胞30 min、2 h、16 h,用Western blot法检测LPS对口腔鳞癌Tca8113细胞中核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响;5、10μg/ml LPS刺激口腔鳞癌Tca8113细胞16 h,用ELISA法检测刺激前后IL-6、IL-8的分泌情况。结果1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR9在人口腔鳞癌Tca8113细胞中均有表达;TLR3、TLR4、TLR7、TLR9表达相对较高,TLR2、TLR5表达相对较低。2、人口腔鳞癌Tca8113细胞中TLR4 m RNA和蛋白水平在LPS的刺激下表达上调。3、MTT检测结果显示,1μg/ml和10μg/ml的LPS能够明显促进Tca8113细胞增殖,与未刺激组相比,差异有统计学意义(P0.05)。用2μg/ml anti-TLR4单克隆抗体预处理细胞30 min,再加入10μg/ml的LPS孵育72 h,细胞增殖受到明显抑制(P0.05)。4、LPS能够活化口腔鳞癌Tca8113细胞中的NF-κB信号通路。5、ELISA检测结果显示,LPS浓度为1μg/ml和10μg/ml时,明显促进的Tca8113细胞分泌IL-6(P0.05)。仅当LPS浓度为10μg/ml时,能观察到IL-8分泌增加(P0.05)。结论1、LPS可上调TLR4在口腔鳞癌Tca8113细胞中的表达。2、激活TLR4可促进口腔鳞癌Tca8113细胞增殖。3、激活TLR4能够活化口腔鳞癌Tca8113细胞中的NF-κB信号通路,促进IL-6、IL-8的分泌。
【关键词】：TLR4 LPS 口腔鳞状细胞癌 IL-6 IL-8
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.85
【目录】：

• 中文论著摘要4-6
• 英文论著摘要6-8
• 英文缩略语表8-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-16
• 实验结果16-23
• 讨论23-24
• 结论24-26
• 本研究创新性的自我评价26-27
• 参考文献27-32
• 文献综述32-41
• 参考文献36-41
• 在校期间科研成绩41-42
• 致谢42-43
• 个人简介43-44

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本文编号：427992