人乳腺癌MCF-7细胞在不同HER-2水平下外泌型miRNAs表达谱检测

发布时间：2017-06-11 21:10

  本文关键词：人乳腺癌MCF-7细胞在不同HER-2水平下外泌型miRNAs表达谱检测，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景：HER-2属于膜酪氨酸激酶,是表皮生长因子受体家族的成员,当HER-2基因被激活,可导致细胞增生活跃和阻碍细胞的凋亡,这为肿瘤在乳腺癌中的发展提供主要的驱动力。MicroRNAs (miRNAs)为一类内源性的非编码RNA,含有18-24个核苷酸。miRNAs主要通过肿瘤生物学如细胞增殖、分化、侵袭、细胞凋亡和转移等方面调节细胞的发生发展。研究结果显示,miRNAs既可扮演癌基因又可扮演抑癌基因参与调控基因的表达。近些年有关HER-2和miRNAs之间关系的报道日益增多,其中有些研究提示乳腺癌的发生发展与HER-2的过表达和miRNAs的失调相关联。本课题组前期的研究也显示不同HER-2表达水平的乳腺癌细胞在miRNAs表达谱上存在差异。因此,探究miRNAs和HER-2之间的联系极为重要。随着液体活检技术的临床意义逐步被人们认识,在临床上对肿瘤患者体液以及在实验室中对肿瘤培养上清内肿瘤细胞外泌物质的研究已成为研究热点。目的：检测不同HER-2表达水平人乳腺癌细胞培养上清中肿瘤细胞外泌的miRNAs,初步筛选出与HER-2表达相关的外泌型miRNAs表达谱。方法：(1)培养人乳腺癌细胞MCF-7和稳定转染HER-2的MCF-7(MCF-7/HER-2),分别收集两株细胞的培养上清,利用miRNAs芯片技术检测其miRNAs的表达,并与MCF-7和MCF-7/HER-2细胞中miRNAs表达谱进行比对。(2)应用生物信息学对miRNAs hsa-miR-5703、hsa-miR-92b-5p和miRNA hsa-miR-589-3p进行与HER-2相关的信号通路的初步预测。结果：(1)通过对样品miRNAs芯片表达谱的结果分析,对照组选取MCF-7细胞培养上清,以上调或下调≥2倍为基准,miRNAs与HER-2相关的通过筛选获得138种,其中有86个miRNAs上调,有52个miRNAs下调。在这些miRNAs中,上调高于5倍的有列举如下:hsa-miR-4489、hsa-miR-92b-5p、hsa-miR-3150b-3p、 hsa-miR-302d-5p、hsa-miR-5703、hsa-miR-583、hsa-miR-582-3p和hsa-miR-4270共8个,而下调高于5倍的有hsa-miR-589-3p。(2)将细胞培养上清液中筛选出与HER-2相关的外泌型miRNAs与本课题组前期研究细胞裂解液中筛选出与HER-2相关的miRNAs进行比对,两者中同时上调的有7种；同时下调的有7种；在细胞培养上清液中上调而在细胞中下调的有1种；在细胞培养上清液中下调而在细胞中上调的有7种。(3)生物信息学方法预测hsa-miR-5703、hsa-miR-92b-5p和hsa-miR-589-3p信号通路可能与HER-2直接或间接相关联。结论：(1)不同HER-2水平的人乳腺癌细胞外泌miRNAs存在差异性表达。(2)人乳腺癌细胞外泌miRNAs与其细胞中miRNAs含量不平行。(3)生物信息学预测提示hsa-miR-57、hsa-miR-92b-5p和hsa-miR-589-3p可能通过与HER-2相关信号通路调控肿瘤的发生发展。
【关键词】：乳腺肿瘤 细胞培养上清 miRNAs
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 1 引言11-13
• 2 材料13-18
• 3 方法18-22
• 4 结果22-28
• 5 讨论28-33
• 6 结论33-34
• 7 小结34
• 8 进一步打算34-35
• 参考文献35-41
• 附录41-43
• 致谢43-44
• 综述44-56
• 参考文献53-56

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1 ;Impact of tiny miRNAs on cancers[J];World Journal of Gastroenterology;2007年04期

2 宋宝;宋现让;刘杰;魏玲;;miRNAs及其靶基因的识别[J];基础医学与临床;2007年09期

3 ;放疗和miRNAs两者关系的研究进展(英文)[J];Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2012年05期

4 王宁;黄辰;姚嘉宜;艾婷;李围围;付学海;宋丽萍;;肺癌相关miRNAs研究进展[J];现代肿瘤医学;2012年05期

5 ;Identification of deregulated miRNAs and their targets in hepatitis B virus-associated hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2012年38期

6 William CS CHO;南娟;;miRNAs作为癌症预测和预后标志物的巨大潜能[J];中国肺癌杂志;2013年01期

7 李长贵;纪艳;;miRNAs和内分泌疾病研究进展[J];中华医学信息导报;2006年21期

8 William CS CHO;南娟;丁燕;;miRNAs在肺癌中的作用[J];中国肺癌杂志;2009年12期

9 Wen Luo,;Qinghua Nie;Xiquan Zhang;;MicroRNAs Involved in Skeletal Muscle Differentiation[J];遗传学报;2013年03期

10 ;Small but influential:the role of microRNAs on gene regulatory network and 3′UTR evolution[J];遗传学报;2009年01期

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1 ;A potential role for Chlamydomonas miRNAs in response to environmental changes[A];中国遗传学会植物遗传和基因组学专业委员会2009年学术研讨会论文摘要汇编[C];2009年

2 Ping Xuan;Maozu Guo;Yangchao Huang;;MaturePred:Efficient Identification of MicroRNAs within Novel Plant Pre-miRNAs[A];第五届全国生物信息学与系统生物学学术大会论文集[C];2012年

3 Zhen-Dong Xiao;Li-Ting Diao;Jian-Hua Yang;Hui Xu;Mian-Bo Huang;Yong-Jin Deng;Hui Zhou;Liang-Hu Qu;;Systematical identification of cis-elements orchestrating the expressions of miRNAs in humans[A];生命的分子机器及其调控网络——2012年全国生物化学与分子生物学学术大会摘要集[C];2012年

4 ;Cell-free miRNAs may indicate diagnosis and docetaxel sensitivity of tumor cells in malignant effusions[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年

5 任波;马迪;李毅;;地高辛标记探针结合化学发光技术快速灵敏检测植物总RNA中的miRNAs方法[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文摘要集[C];2005年

6 任波;马迪;李毅;;地高辛标记探针结合化学发光技术快速灵敏检测植物总RNA中的miRNAs方法[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文集[C];2005年

7 戚鹏;韩金祥;鲁艳芹;王传玺;栾中华;卜范峰;;病毒编码的miRNAs:基因表达新的调控因子[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年

8 ;Bioinformatic identification and expression analysis of new microRNAs from Medicago truncatula[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

9 ;Cell-free miRNAs may indicate diagnosis and docetaxel sensitivity of tumor cells in malignant effusions[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年

10 ;miRNAs involved in Tau expression of BMSCs induced neurons[A];中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会论文摘要集[C];2011年

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1 江尚;特异性miRNAs与前列腺癌发病密切相关[N];中国医药报;2007年

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