热休克蛋白HSP32、HSP27在食管鳞癌转移中作用的研究

发布时间：2017-06-22 06:06

  本文关键词：热休克蛋白HSP32、HSP27在食管鳞癌转移中作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,我国食管癌患者的死亡率为15.15/10万人[1],5年生存率仅5%~10%,其中95%的临床病理学特征为鳞癌。死亡的重要因素是早期即出现侵袭和转移,其作用机制仍不明确,涉及到肿瘤细胞与宿主之间的相互作用,可能与多种基因及蛋白质的表达相关。热休克蛋白是一类高度进化保守的应激蛋白,可被多种刺激诱导合成产生,如肿瘤、缺氧和其他化学刺激。其参与肿瘤发生、发展、免疫逃逸、治疗及预后等过程。近年来,大量研究表明热休克蛋白家族中的HSP32、HSP27,可能参与了多种肿瘤的发生发展过程,然而关于HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用并未见报道。目的研究热休克蛋白HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用。方法1.免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织中HSP32、HSP27的表达,并分析其与临床病理资料的相关性;2.利用体外细胞划痕、Transwell实验检测食管鳞癌高低转移细胞亚系转移潜能的差异;3.Western blot和q RT-PCR测定HSP32、HSP27在食管鳞癌不同转移潜能细胞亚系中表达水平的变化,分析HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用;4.利用慢病毒转染技术上调HSP27在高转移潜能细胞亚系中的表达水平,通过体外Transwell、细胞划痕实验及体内裸鼠转移实验,观察HSP27上调后食管鳞癌细胞侵袭转移能力的变化;结果1.HSP32在食管鳞癌组织中呈高表达,其阳性表达率与肿瘤分化程度(P=0.039)、浸润程度T分期(P=0.020)、淋巴结转移(P=0.017)、淋巴管浸润(P=0.037)、远处转移(P=0.038)有显著相关性;HSP27在食管鳞癌组织中表达水平降低,其表达与肿瘤分化密切相关(P=0.023),与TNM分期(P=0.013),淋巴结转移(P=0.020)和远处转移(P=0.017)有关,而与性别(P=0.752)和患者的年龄(P=0.771)无显著相关性;2.EC9706-H、EC109-H细胞亚系侵袭转移能力高;EC9706-L、EC109-L细胞亚系侵袭转移能力低;3.HSP32在两对高转移潜能细胞亚系中表达水平较相应的低转移细胞亚系表达升高;HSP27在两对高转移潜能细胞亚系中表达水平较相应的低转移细胞亚系表达降低;4.利用慢病毒转染技术特异性上调了高转移潜能细胞亚系中HSP27的表达水平,细胞划痕实验和Transwell实验证实其侵袭转移能力下降;5.体内裸鼠转移实验证实,在高转移潜能细胞亚系中上调HSP27表达后,食管鳞癌细胞的体内侵袭和转移能力下降;结论1.HSP32、HSP27与食管鳞癌的侵袭转移密切相关,但不同蛋白所起的作用并不相同。HSP32的表达水平与食管癌淋巴结转移呈正相关,HSP27的表达水平与食管鳞癌淋巴结转移呈负相关;2.上调HSP27表达水平后,能在体内外抑制食管鳞癌细胞EC9706-H及EC109-H的侵袭和转移能力;
【关键词】：HSP32 HSP27 食管鳞癌 转移 侵袭
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 缩略语表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-15
• 文献回顾15-29
• 一.食管癌病因及发病机制15-16
• 二.肿瘤细胞生物学特性16
• 三.食管癌的扩散和转移方式16-17
• 四.与肿瘤转移相关的因素17
• 五.热休克蛋白17-29
• 第一部分 HSP32在食管鳞癌转移中作用的研究29-49
• 前言29
• 实验一 HSP32在食管鳞癌组织中的表达29-34
• 1 材料29-31
• 2 方法31-32
• 3 结果32-34
• 实验二 食管鳞癌高低转移潜能细胞亚系转移能力的差异34-39
• 1 材料34-35
• 2 方法35-36
• 3 结果36-39
• 实验三 HSP32在食管鳞癌高低转移潜能细胞亚系中MRNA表达差异39-43
• 1 材料39-40
• 2 方法40-42
• 3 结果42-43
• 实验四 HSP32在食管鳞癌高低转移潜能细胞亚系中蛋白表达差异43-47
• 1 材料43-44
• 2 方法44-45
• 3 结果45-47
• 讨论47-49
• 第二部分 HSP27在食管鳞癌转移中作用的研究49-71
• 前言49
• 实验一 HSP27在食管鳞癌组织中的表达49-53
• 1 材料49-51
• 2 方法51
• 3 结果51-53
• 实验二 HSP27在食管鳞癌高低转移潜能细胞亚系中蛋白表达差异53-56
• 1 材料53-54
• 2 方法54-55
• 3 结果55-56
• 实验三 转染慢病毒后细胞HSP27蛋白的表达水平56-60
• 1 材料56-57
• 2 方法57-58
• 3 结果58-60
• 实验四 特异性上调HSP27对食管鳞癌细胞体外侵袭转移的影响60-66
• 1 材料60-61
• 2 方法61
• 3 结果61-66
• 实验五 特异性上调HSP27对食管鳞癌细胞体内侵袭转移的影响66-69
• 1 材料66
• 2 方法66-67
• 3 结果67-69
• 讨论69-71
• 小结71-72
• 参考文献72-82
• 个人简历和研究成果82-83
• 致谢83

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张健;朱成楚;陈保富;马德华;张波;万雷;;血红素加氧酶-1在食管癌中的表达及意义[J];实用医学杂志;2011年20期

2 姜赤晓;许小峰;;血红素加氧酶-1的研究进展[J];中国医药导报;2009年27期

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本文编号：470884