紫杉醇与大黄素联用对小鼠EMT6乳腺癌治疗效果病理学评价

发布时间：2017-06-22 13:20

  本文关键词：紫杉醇与大黄素联用对小鼠EMT6乳腺癌治疗效果病理学评价，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：近年来,我国女性乳腺癌发病率呈快速上升趋势,逐渐成为危害女性健康的主要疾病。有实验结果表明,大黄素与紫杉醇合用对肿瘤细胞的体外增殖抑制率高于单独使用紫杉醇或者大黄素,本实验利用EMT6乳腺癌细胞株建立小鼠乳腺癌模型,通过紫杉醇联合大黄素进行药物治疗,以HE染色观察形态学变化,免疫组化检测血管内皮生长因子(VEGF).和Ki-67以及TUNEL检测细胞凋亡作为相应指标,对治疗效果的进行组织病理学评价。方法：制备移植性EMT6乳腺癌荷瘤小鼠动物模型,随机分为4组,模型对照组、联合用药组、紫杉醇组、大黄素组,每组8只小鼠,分别给予相应的药物干预,15天后剖取肿瘤进行以下实验操作：①一般观察；②HE染色观察；③免疫组化检测VEGF和Ki-67；④TUNEL检测细胞凋亡。试验结果均采用均数±标准差(x+SD)的形式表示,使用SPSS17.0统计学分析软件进行分析和处理数据。结果：1.实验组剖取肿瘤的瘤重分别为：模型组对照组4.334-1.43g、紫杉醇组2.974±0.72g、大黄素组3.93+0.89g、联合用药组2.47+0.74g,给药组抑瘤率分别为紫杉醇组31.24%、大黄素组9.13%、联合用药组42.92%,紫杉醇组及联合用药组分别与模型对照组比较,有统计学差异(p0.05)。2.HE染色可明显观察到,模型对照组及大黄素组肿瘤组织中肿瘤细胞排列紧密,核质比增大,肿瘤实质和间质分解不清,细胞形态不规则,病理性核分裂相多,肿瘤间质可见新生血管,但基底膜不完整,偶见肿瘤细胞入侵血管造成的血栓；联合用药组及紫杉醇组肿瘤组织排列相对较疏松,瘤灶内出现多发性片状坏死,组织中心有许多空隙,其中可见蛋白样物质及细胞碎片,并可见血管轮廓被破坏,两组均较为明细。3.实验各组VEGF积分光密度的表达水平分别为：模型组对照组0.27±0.09、紫杉醇组0.15±0.02、大黄素组0.204±0.03、联合用药组0.11±0.03,紫杉醇组、联合用药组与模型对照组比较,有统计学差异(p0.05)。Ki-67积分光密度的表达水平分别为：模型组对照组0.454±0.10、紫杉醇组0.24±0.04、大黄素组0.364±0.05、联合用药组0.18±0.06,联合用药组与模型对照组比较,有统计学差异(p0.05)。4.TUNEL检测实验各组凋亡水平分别为：模型组对照组8.50±4.96、紫杉醇组24.18±9.10、大黄素组32.52±6.79、联合用药组67.28±10.38,联合用药组分别与模型对照组比较,有统计学极显著差异(p0.01),紫杉醇组及大黄素组分别与模型对照组比较,有统计学差异(p0.05)。5.Ki-67的表达与细胞的凋亡呈负相关。结论：从以上实验结果相关评价来看,紫杉醇和大黄素的联合作用可减少肿瘤血管的生成、抑制肿瘤细胞的增殖、并且加速肿瘤细胞的凋亡,在Balb/c小鼠活体内紫杉醇联合大黄素具有抑制EMT6肿瘤细胞生长的作用,且具有协同作用。
【关键词】：乳腺癌 EMT6细胞 VEGF Ki-67 细胞凋亡
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 1. 文献综述9-18
• 1.1 乳腺癌概述9
• 1.2 乳腺癌模型的研究进展9-14
• 1.2.1 实验动物10
• 1.2.2 造模方法10-14
• 1.3 VEGF简介14-16
• 1.3.1 VEGF的结构和表达15
• 1.3.2 VEGF的生物学功能15-16
• 1.4 Ki-67简介16-17
• 1.4.1 Ki-67的结构和表达16
• 1.4.2 Ki-67的生物学功能16-17
• 1.5 紫杉醇的药理作用17-18
• 1.6 大黄素的药理作用18
• 1.7 紫杉醇与大黄素的联合作用18
• 2. 材料与方法18-25
• 2.1 实验材料18-19
• 2.1.1 受试药物18
• 2.1.2 细胞株18
• 2.1.3 化学试剂18-19
• 2.1.4 设备仪器19
• 2.1.5 实验动物19
• 2.2 实验方法19-25
• 2.2.1 EMT6细胞的培养20
• 2.2.2 EMT6细胞Balb/c小鼠荷瘤模型的建立20
• 2.2.3 分组及给药20-21
• 2.2.4 饲养环境21
• 2.2.5 肿瘤抑制率测定21
• 2.2.6 肿瘤组织HE染色21-22
• 2.2.7 肿瘤组织免疫组化(S-P法)22-23
• 2.2.8 肿瘤组织切片的TUNEL染色23-24
• 2.2.9 图像分析原理24
• 2.2.10 图像采集及处理方法24
• 2.2.11 统计学处理及结果显示24-25
• 2.2.12 技术路线图25
• 3 实验结果25-37
• 3.1 EMT6细胞培养25-26
• 3.2 肿瘤的一般观察26-27
• 3.3 肿瘤抑制率的测定27
• 3.4 肿瘤组织HE染色结果27-30
• 3.5. 肿瘤组织VEGF检测结果30-32
• 3.6 肿瘤组织Ki-67检测结果32-34
• 3.7 原位细胞凋亡实验结果34-37
• 4. 实验讨论37-39
• 英文缩写一览表39-40
• 参考文献40-46
• 致谢46

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本文编号：471975