局部晚期非小细胞肺癌患者血清miR-23a表达与放化疗敏感性相关研究

发布时间：2017-06-24 01:05

  本文关键词：局部晚期非小细胞肺癌患者血清miR-23a表达与放化疗敏感性相关研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景及目的:肺癌是目前世界范围内病死率最高的肿瘤之一,病理类型以非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)为主,仅有14%-20%的患者能够进行手术切除,多数患者因为淋巴结转移、肿瘤邻近胸膜或大血管失去手术机会。而对于不能进行手术的局部晚期NSCLC患者,同步放化疗是其标准治疗方案。肿瘤细胞对放化疗敏感性的差异影响患者的治疗效果。随着同步放化疗在临床上的广泛应用,放化疗敏感性的研究成为肿瘤个体化治疗的关键一环,具有重要意义。MicroRNA是一类非编码的单链小分子RNA,参与影响肿瘤放化疗敏感性的多个环节。本研究团队的前期工作采用miRNA芯片技术筛选和NSCLC患者肿瘤乏氧相关的miRNAs,研究结果显示miR-23a在肿瘤乏氧组织中显著高表达。这可能与LA-NSCLC患者放化疗抵抗相关,因此本课题主要探索miR-23与NSCLC患者放化疗敏感性的关系。研究方法:1、收集76例初治局部晚期非小细胞肺癌患者治疗前血清标本,提取血清RNA。同时根据患者放疗前后CT及RESIST标准分为放化疗敏感组和抵抗组,实时定量荧光PCR监测两组标本中microRNA-23a的表达量的差异。2、通过RT-PCR检测普通肺腺癌A549细胞株及放疗抵抗A549细胞株miR-23a的表达差异。3、转染miR-23a-inhibitor到放疗抵抗A549细胞株沉默miR-23a表达;普通A549细胞株转入miR-23a-mimics模拟过表达。RT-PCR及流式细胞仪检测转染效率。4、检测细胞增殖(MTT法),并采用流式细胞仪检测放疗后R-A549细胞凋亡率等实验,比较不同miR-23a表达状态对放疗抵抗A549细胞生物学行为的影响。结果:1、本研究纳入76例经病理诊断的局部晚期非小细胞肺癌患者,其中男性45例,女性31例,中位年龄为58岁,其中鳞癌患者42例,非鳞癌患者34例;肿瘤IIIA期患者30例,IIIB患者46例;另外收集35例健康人的血清,其中21例男性,女性14例,健康人对照组平均年龄为53岁。入组的实验组与对照组患者的年龄、性别、KPS评分等的差异无统计学意义。2、入组患者排除放化疗禁忌后行个体化同步放化疗,治疗后6个月内根据RECIST标准评价疗效,其中6例获CR,49例PR,18例SD,以及3例PD。定义放射敏感组为CR和PR,放疗抵抗组为SD和PD。PCR检测miR-23a的相对定量结果采用2-△△Ct法计算。研究证明:1)NSCLC患者(实验组)的血清miR-23a相对表达量是健康对照组的4.19倍。表明miR-23a可作为NSCLC诊断的血清学标记物;2)放疗抵抗组的miR-23a表达量是放疗敏感组的2.97倍。表明miR-23a有可能成为预测非小细胞肺癌患者放化疗敏感性的指标。3、采用2-△△Ct法计算放疗抵抗A549(R-A549)和普通A549细胞株miR-23a表达差异,结果显示:放疗抵抗A549细胞的miR-23a表达是普通A549细胞的3.43倍。4、凋亡实验显示:miR-23a-inhibitor转染R-A549细胞,显示沉默miR-23a表达可增加R-A549细胞凋亡,改善R-A549细胞的放疗抵抗。MTT增殖实验显示:miR-23amimic转染普通A549细胞,相比NC组A549细胞增殖增加,对放射线敏感性明显降低;而miR-23a-inhibitor转染R-A549细胞,相比NC组R-A549细胞增殖明显减少,细胞对放射线敏感性明显增加。结论:局部晚期NSCLC患者治疗前血清中microRNA-23a表达水平对NSCLC患者有潜在的诊断价值;并将有可能成为预测不可手术NSCLC患者同步放化疗敏感性的血清标记。治疗前血清miR-23a高表达患者往往对同步放化疗不敏感。细胞实验也证实沉默miR-23a表达可增加放疗诱导的细胞凋亡,同时细胞增殖率明显降低。
【关键词】：非小细胞肺癌 MicroRNA-23a 同步放化疗 放疗敏感性
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 主要符号表9-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 局部晚期非小细胞肺癌患者血清micro RNA-23a表达与放化疗敏感性关系13-25
• 2.1 病例选择13-14
• 2.2 治疗方法14-15
• 2.3 疗效评价15-16
• 2.4 实验耗材16-17
• 2.5 实验方法17-20
• 2.6 统计学方法20
• 2.7 实验结果20-22
• 2.8 讨论22-25
• 第三章 micro RNA-23a对A549和R-A549细胞放疗敏感性的影响25-32
• 3.1 实验材料25-26
• 3.2 实验方法26-29
• 3.3 实验结果29-31
• 3.4 讨论31-32
• 全文结论32
• 局限性32-33
• 参考文献33-38
• 攻读学位期间取得的研究成果38-39
• 致谢39

【参考文献】

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  本文关键词：局部晚期非小细胞肺癌患者血清miR-23a表达与放化疗敏感性相关研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：476720