PRMT2对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响及机制研究

发布时间：2017-06-25 21:03

  本文关键词：PRMT2对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响及机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨蛋白精氨酸甲基转移酶.2(protein.arginine.methyltransferase.2,PRMT2)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭与迁移的影响及可能的机制。方法:将构建好的真核表达载体瞬时转染至MDA-MB-231细胞,Western Blot检测EMT相关蛋白的表达,观察PRMT2对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响;建立PRMT2高表达的稳定细胞系MDA-MB-231-PRMT2,显微镜观察PRMT2高表达后细胞形态的变化,Transwell及划痕实验检测PRMT2高表达对细胞侵袭及迁移能力的影响,Western Blot检测EMT相关蛋白的表达,进一步验证和分析PRMT2对MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响;蛋白质芯片技术检测PRMT2影响细胞的可能信号通路,Western Blot检测通路相关蛋白的表达,初步探讨PRMT2影响乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的机制。结果:1.Western Blot结果显示PRMT2瞬时高表达后E-cadherin的表达水平下调(p0.05),Slug和Vimentin的表达水平上调(p0.05);PRMT2瞬时低表达后E-cadherin的表达水平上调(p0.05),Slug和Vimentin的表达水平下调(p0.05)。2.PRMT2稳定高表达后,显微镜观察到明显的形态变化,Transwell实验表明四环素诱导组细胞侵袭率较无四环素诱导组增加(p0.001),划痕实验显示细胞迁移率无明显改变(p0.05),对EMT相关蛋白表达水平的影响均与瞬时转染的结果一致。3.蛋白质芯片结果提示Wnt/β-catenin可能为PRMT2影响细胞侵袭与迁移的信号通路,且磷酸化GSK-3β(Ser9)表达上调(p0.05),磷酸化β-catenin表达下调(p0.05)。结论:1.PRMT2促进乳腺癌MDA-MB-231细胞EMT形成。2.PRMT2促进乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭。3.PRMT2通过调控磷酸化β-catenin的表达而影响乳腺癌MDAMB-231细胞侵袭与迁移。
【关键词】：乳腺癌细胞 蛋白精氨酸甲基转移酶2 侵袭 迁移
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 第1章 引言13-15
• 第2章 实验材料15-21
• 2.1 实验载体15
• 2.2 实验细胞15
• 2.3 实验试剂15-16
• 2.4 实验仪器和设备16-17
• 2.5 主要试剂的配制17-21
• 第3章 实验方法21-29
• 3.1 细胞培养及处理21
• 3.2 细胞瞬时转染21-23
• 3.3 Western blot23-25
• 3.4 细胞形态观察及图像采集25
• 3.5 Transwell及划痕实验25-26
• 3.6 蛋白质芯片26-27
• 3.7 数据统计及分析27-29
• 第4章 实验结果29-37
• 4.1 PRMT2瞬时高表达及低表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响29-31
• 4.2 PRMT2稳定高表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响31-35
• 4.3 PRMT2稳定高表达后影响乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的机制研究35-37
• 第5章 讨论37-41
• 第6章 实验结论41-43
• 参考文献43-47
• 综述47-57
• 参考文献52-57
• 科研成果57-58
• 致谢58

【共引文献】

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