骨肉瘤中WIF-1基因启动子区异常甲基化及mRNA的表达研究

发布时间：2017-07-03 10:27

  本文关键词：骨肉瘤中WIF-1基因启动子区异常甲基化及mRNA的表达研究

  更多相关文章： 骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 实时荧光定量RT-PCR

【摘要】：目的:WIF-1作为Wnt家族成员之一,通过结合Wnt蛋白来抑制Wnt信号通路的传导,影响细胞内基因表达。本实验通过检测骨肉瘤中WIF-1启动子区甲基化状态及m RNA的表达水平,探讨两者与骨肉瘤临床病理关系,为骨肉瘤患者的临床治疗奠定理论基础。方法:搜集从2008年到2014年青岛大学附属医院病理科石蜡包埋骨肉瘤组织标本以及手术切除置于-70℃保存的骨肉瘤组织40例为实验组,石蜡包埋骨软骨瘤组织以及手术切除置于-70℃保存的骨软骨瘤组织20例为对照组,并采集患者就医材料以及病理诊断信息。通过利用甲基化特异性PCR技术(methylation specific PCR,MSP)检测骨肉瘤组织及骨软骨肉瘤组织中Wl F-1基因启动子区甲基化状态,研究Wl F-1基因甲基化状态与临床病理学之间的相关性。应用实时荧光定量RT-PCR技术检测WIF-1基因m RNA在骨肉瘤组织及骨软骨肉瘤组织的表达水平,研究m RNA的相对表达量在骨肉瘤组织及骨软骨肉瘤组织的表达差异以及其与临床病理学之间的关系。综上所述,分析骨肉瘤中WIF-1基因甲基化率与m RNA相对表达量之间的关系,探讨两者在骨肉瘤发生发展过程中的作用。采用SPSSl9.0统计软件对所有数据进行统计学处理,运用X2检验或Fisher精确概率法,t检验等统计学方法,均用双侧检验的方法,以P0.05为差异具有统计学意义。结果:1.Wl F-1基因在骨肉瘤组织中甲基化率55%(22/40)明显比骨软骨瘤组织甲基化率高20%(4/20)(P0.05)。WIF-1基因甲基化阳性率与年龄、性别等无相关性(P0.05),但是在骨肉瘤病理低分化组甲基化所占比例82.61%(19/23)明显高于骨肉瘤高分化组甲基化所占比例17.65%(3/17)(P0.05)。2.WIF-1基因m RNA的相对表达量在骨肉瘤组和骨软骨肉瘤组分别是(0.361±0.303)和(0.760±0.256)(P0.001)。WIF-1基因m RNA的相对表达量与年龄、性别等无相关性(P0.05),但是在病理低分化组为(0.201±0.233)明显低于高分化组甲(0.578±0.250)(P0.001)。3.骨肉瘤中WIF-1启动子区甲基化状态的mRNA相对表达量(0.139±0.131)明显低于非甲基化状态的m RNA的相对表达量(0.642±0.188)(P0.001)。结论:WIF-1基因启动子区甲基化可能异常激活经典和非经典Wnt信号通路,影响m RNA相对表达量,从而影响骨肉瘤的发生发展过程。
【关键词】：骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 实时荧光定量RT-PCR
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R738.1
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料与方法10-17
• 1.1 实验材料10-11
• 1.1.1 实验标本10
• 1.1.2 实验试剂10-11
• 1.2 实验过程及方法11-16
• 1.2.1 检测标本中WIF-1 基因启动子区甲基化情况11-13
• 1.2.2 实时荧光定量RT-PCR检测WIF-1 基因的表达13-16
• 1.3 结果统计学分析16-17
• 第二章 实验结果与分析17-21
• 2.1 骨肉瘤与骨软骨瘤组织中WIF-1 启动子区甲基化分析17
• 2.2 骨肉瘤与骨软骨瘤组织中WIF-1 基因mRNA的表达情况17
• 2.3 骨肉瘤中WIF-1 甲基化与mRNA的表达之间的关系17-21
• 第三章 讨论21-24
• 结论24-25
• 参考文献25-29
• 综述29-41
• 参考文献36-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 任杰;周清华;;WIF-1研究进展[J];中国肺癌杂志;2007年03期

2 齐健;朱尤庆;罗峻;陶文惠;;分泌型Wnt拮抗基因甲基化在结直肠肿瘤发生发展中的作用[J];中华医学杂志;2007年28期

  本文关键词：骨肉瘤中WIF-1基因启动子区异常甲基化及mRNA的表达研究

  更多相关文章： 骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 实时荧光定量RT-PCR

，

本文编号：513341