前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体促进前列腺癌生长及侵袭转移能力的研究

发布时间：2017-07-03 23:17

  本文关键词：前列腺癌相关成纤维细胞中雄激素受体促进前列腺癌生长及侵袭转移能力的研究

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【摘要】：目的探讨前列腺癌(PCa)相关成纤维细胞(CAF)中雄激素受体(雄激素受体)对PCa生长及侵袭转移能力的作用。方法(1)用基因沉默方法干预已经原代培养并永生化的CAF细胞中雄激素受体的表达水平,建立雄激素受体低表达细胞(CAF-ARsi)和阴性对照细胞(CAF-sc),用Western Blot方法检测雄激素受体表达水平；(2)用实时定量PCR方法检测阻断雄激素受体对CAF分泌生长因子的影响；(3)将CAF-ARsi、CAF-sc细胞与PCa细胞株体外共培养,用MTT方法、软琼脂糖凝胶实验、Transwell侵袭实验检测CAF中雄激素受体表达水平对PCa细胞体外贴壁生长、悬浮生长、侵袭能力的影响。结果(1)成功建立雄激素受体低表达细胞(CAF-ARsi)和阴性对照细胞(CAF-sc).基因沉默以后,雄激素受体mRNA及蛋白表达水平显著降低,在报告基因分析中,雄激素受体功能显著降低；(2)将CAF-ARsi、CAF-sc细胞与PCa细胞株PC3体外共培养,发现干扰CAF中的雄激素受体能够抑制PC3细胞的体外贴壁生长能力、悬浮生长能力及侵袭转移能力；(3)干扰CAF细胞中的雄激素受体能够明显降低IGF1,FGF7,FGF10,SDF1,HGF等生长因子的表达水平。结论雄激素受体(AR)在前列腺肿瘤活性基质细胞(CAF)中扮演着重要的角色,干扰CAF细胞的雄激素受体能够显著抑制前列腺癌细胞的生长及侵袭转移能力。
【关键词】：前列腺癌 癌相关成纤维细胞 生长 侵袭转移 共培养
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.25
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-10
• 第1章 材料和方法10-18
• 1.1 实验材料10-14
• 1.1.1 主要试剂(盒)及抗体10-11
• 1.1.2 溶液配制11-12
• 1.1.3 PCR引物12-14
• 1.1.4 细胞14
• 1.1.5 主要实验设备14
• 1.2 实验方法14-18
• 1.2.1 CAF细胞培养及检测14-15
• 1.2.2 CAF细胞与PC3细胞体外共培养并检测生长及侵袭转移能力15-17
• 1.2.3 统计学处理17-18
• 第2章 结果18-21
• 2.1 CAF细胞培养及检测结果18
• 2.2 CAF细胞与PC3细胞体外共培养并检测生长及侵袭转移能力结果18-21
• 2.2.1 实时定量PCR检测生长因子表达水平情况18-19
• 2.2.2 MTT法观察PC3贴壁生长能力情况19
• 2.2.3 软琼脂糖凝胶实验观察PC3悬浮生长能力情况19-20
• 2.2.4 Transwell实验观察PC3侵袭能力情况20-21
• 第3章 讨论21-25
• 结论25-26
• 参考文献26-28
• 综述 雄激素受体在前列戚阱瘤活性基质中的作用研究进展28-45
• 参考文献40-45
• 致谢45-46
• 攻读学位期间取得的成果46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 于胜强;王科;杨典东;王健涛;李光磊;高振利;;前列腺癌相关成纤维细胞的分离培养与鉴定[J];中华实验外科杂志;2014年03期

2 陈珊珊;姚和瑞;;乳腺癌相关成纤维细胞的研究进展[J];中华乳腺病杂志(电子版);2012年03期

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本文编号：515562