WTX基因在肝癌组织和细胞株中的表达及临床意义

发布时间：2017-07-04 20:01

  本文关键词：WTX基因在肝癌组织和细胞株中的表达及临床意义

  更多相关文章： 抑癌基因 WTX 肝细胞癌 蛋白质免疫印迹法 逆转录聚合酶链反应

【摘要】：目的:研究WTX(Wilms Tumor gene on the X chromosome)基因在正常肝组织、癌旁组织及肝癌组织中的表达水平,检测WTX基因在正常肝细胞及不同恶性程度的肝癌细胞中的表达,分析比较WTX基因的表达与细胞恶性程度的关系。探讨WTX基因在肝癌中的表达及其意义。方法:1、收集40例术前无其他恶性肿瘤病史、未经放疗、化疗、生物治疗等并接受手术治疗患者的肝癌组织、癌旁组织(距病灶边缘2cm以内的肝脏组织)及因肝内胆管结石、外伤切除部分的正常肝组织为正常对照组。2、应用RT-PCR方法检测WTX基因m RNA在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中的表达水平及其意义。3、应用RT-PCR及Western Blot方法,检测正常肝细胞与不同恶性程度的肝癌细胞中,WTX基因m RNA和蛋白质的表达差异,分析WTX基因在不同恶性程度肝癌细胞之间的联系。结果:1、通过RT-PCR对原发性肝细胞癌组织标本中WTX基因m RNA的表达水平检测,提示癌组织明显低于癌旁组织及正常组织,二者差异具有统计学意义(P0.05)。2、WTX基因的m RNA表达水平与肝癌的临床TNM分期、肿瘤大小、分化程度、区域淋巴结转移相关(P0.05)。3、WTX基因的m RNA及蛋白质在正常肝细胞株中呈高表达,在各肝癌细胞株中呈低表达,差异具有统计学意义(P0.05);而各肝癌细胞株中,各组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论:WTX抑癌基因在肝细胞癌组织中的表达与肝癌的恶性程度、大小呈负相关,而与肝癌细胞株的侵袭转移能力可能没有密切关系,WTX基因的表达缺失可能是肝细胞癌发生的因素之一。
【关键词】：抑癌基因 WTX 肝细胞癌 蛋白质免疫印迹法 逆转录聚合酶链反应
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料与方法12-24
• 2.1 RT-PCR检测WTX基因在肝癌组织中的转录水平的表达12-16
• 2.1.1 实验标本12
• 2.1.2 实验分组12-13
• 2.1.3 主要试剂13
• 2.1.4 主要仪器13-14
• 2.1.5 引物设计14
• 2.1.6 试验方法14-16
• 2.2 RT-PCR检测WTX基因在各细胞株中转录水平的表达16-19
• 2.2.1 实验标本16-17
• 2.2.2 主要试剂17
• 2.2.3 主要仪器17
• 2.2.4 引物设计17
• 2.2.5 细胞培养17-18
• 2.2.6 各细胞株总RNA提取18
• 2.2.7 cDNA第一链的合成18
• 2.2.8 RT-PCR反应18
• 2.2.9 琼脂糖凝胶电泳18-19
• 2.2.10 结果分析19
• 2.3 Western-Blot检测WTX基因在蛋白质中的表达水平19-24
• 2.3.1 实验分组19
• 2.3.2 主要试剂19-20
• 2.3.3 主要仪器20
• 2.3.4 主要试剂的配制20-21
• 2.3.5 实验方法21-23
• 2.3.6 统计学分析方法23-24
• 第3章 结果24-31
• 3.1 WTX mRNA及蛋白质在肝细胞株及各肝癌细胞株中的表达情况24-27
• 3.2 WTX mRNA在正常肝组织及肝癌组织中的表达情况与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、临床TNM分期、淋巴结转移情况的关系27-31
• 第4章 讨论31-35
• 4.1 WTX基因在正常肝细胞株和肝癌细胞株中的表达意义31-33
• 4.2 WTX基因在正常肝组织、癌旁和肝癌组织中的表达及临床意义33
• 4.3 WTX基因的表达与肝癌临床病理特征间的关系33-35
• 第5章 结论与展望35-36
• 5.1 结论35
• 5.2 展望35-36
• 致谢36-37
• 参考文献37-40
• 综述40-47
• 参考文献44-47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 Raphael JF Felizardo;Niels OS Cmara;;Hepatocellular carcinoma and food contamination: Ochratoxin A as a great prompter[J];World Journal of Gastroenterology;2013年24期

2 Manal A Hamed;Sanaa A Ali;;Non-viral factors contributing to hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2013年06期

3 刘霞;王启明;牛会林;杨学习;孙静哲;张庆玲;丁彦青;;胃癌中新抑癌基因WTX启动子区域甲基化水平的检测(英文)[J];南方医科大学学报;2013年03期

4 李思齐;张毅;梁道明;周东;袁勇;陈嘉勇;;抑癌基因WTX在结肠癌中的表达及其意义[J];中国普通外科杂志;2012年10期

5 张庆玲;于莉娜;丁彦青;;新抑癌基因WTX在肾肿瘤中的表达及意义[J];广东医学;2011年10期

6 王秀梅;刘成敏;张成仁;谢晓华;徐旭光;王玲;杨宝峰;;TGF-β/Smads信号传导通路与肿瘤关系的研究[J];现代肿瘤医学;2009年08期

7 肖建;时宝忆;王丹;;Wnt信号通路与消化道肿瘤[J];临床消化病杂志;2009年02期

8 董荣春,周荣华,吕发度,陶文照;SMMC-7721人体肝癌细胞株的建立及其生物学特性的初步观察[J];第二军医大学学报;1980年01期

，

本文编号：519090